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本研究以LacZ基因为报告基因,构建了两种载体质粒:p-CMV-β-Gal和p-OV-β-Gal,分别利用显微注射法和精子介导法将这两种载体质粒转移到鸡早期胚胎内,对外源基因的整合及表达情况进行检测分析。同时,对添加抗菌素溶液是否有利于鸡胚的正常发育进行了探讨。结果如下: 1、在处理过的受精蛋中添加一定量的抗菌素(青、链霉素)溶液对于提高鸡胚抵御外部环境污染能力、避免鸡胚早期死亡的效果并不显著,但在实际试验过程中发现添加的抗菌素溶液能起到补充水分的作用,保证鸡胚的正常发育。 2、利用显微注射法转移载体质粒(p-CMV-β-Gal)的过程破坏了受精蛋的结构,对鸡胚的发育造成影响,表现在鸡胚在早期孵化阶段大批死亡,死亡率高达58.07%(367/632),但这种方法能够将载体质粒转移到鸡早期胚胎内,外源基因整合阳性率为21.43%(15/70),在部分鸡胚中能检测到外源基因的表达,阳性率为9.52%(4/42)。 3、利用精子介导法能将载体质粒(p-OV-β-Gal)转移到鸡早期胚胎内,外源基因整合阳性率为5.91%(11/186),表达阳性率为16.94%(41/242)。 以上试验结果显示:显微注射法和精子介导法均能将载体质粒转移到鸡早期胚胎中,外源基因能被整合到宿主基因组中,有些能进一步得到表达。说明这两种方法均可作为制备转基因鸡的研究方法。