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目的主要研究具有引导性骨再生作用的n-HA/CS/CMC膜与n-HA/CS/CMC组织工程骨单独及联合应用修复节段性骨缺损的可行性。为新型n-HA/CS/CMC膜与n-HA/CS/CMC组织工程骨多孔材料能否应用于临床提供理论基础,并探讨引导性骨组织再生膜与组织工程骨联合应用对骨缺损修复的影响。实验方法1,体外实验:取新西兰兔骨髓经密度梯度离心法分离兔骨髓间充质干细胞及成骨诱导分化培养成骨细胞,比较BMSCs及成骨细胞生长情况,碱性磷酸酶染色及钙质染色检测成骨诱导细胞。将BMSCs及成骨细胞以1.0×105/ml分别接种到n-HA/CS/CMC三元多孔复合材料及n-HA/PA66上,进行体外共培养,观测细胞生长及粘附情况,MTT法检测细胞生长及增殖。2,体内实验:制作新西兰兔双侧桡骨10mm节段性骨缺损模型,实验根据植入不同材料分为A、B、C组。A组分为AL组和AR组,AL组左侧桡骨缺损处植入n-HA/CS/CMC+BMSCs,外包n-HA/CS/CMC膜,AR组右侧桡骨缺损植入n-HA/CS/CMC+成骨细胞,外包n-HA/CS/CMC膜; B组: BL组左侧桡骨缺损植入n-HA/CS/CMC+BMSCs+BMSCs,外不包膜,BR组右侧桡骨缺损植入n-HA/PA66+BMSCs,外包n-HA/CS/CMC膜;C组:CL组左侧桡骨缺损周围包绕n-HA/CS/CMC膜,CR组右侧桡骨缺损区不填充任何植入物,为空白对照组。术后进行大体观察和X线检查,组织学观察,植入区BMP及VEGF浓度检测。结果1,体外实验:MSCs及成骨细胞在n-HA/CS/CMC三元多孔复合材料及n-HA/PA66上贴附、生长良好。2,体内实验:经大体观察、X线、组织学及BMP、VEGF检测发现,术后4周后A、B各组及CL组骨缺损区均有新骨生成,成骨量随着时间的推移而增加,且AL组、AR组及BR组较BL和CL组成骨更早,局部成骨诱导因子浓度更高。结论1,体外实验:n-HA/CS/CMC(纳米羟基磷灰石/壳聚糖/羧甲基纤维素)三元多孔复合材料可作为理想的构建组织工程骨载体进行骨缺损修复研究。2,体内实验:BMSCs或成骨细胞复合n-HA/CS/CMC三元多孔复合材料构建的组织工程骨可作为节段性骨缺损的修复材料,n-HA/CS/CMC三元复合膜有引导性骨再生作用,n-HA/CS/CMC三元多孔复合组织工程骨与n-HA/CS/CMC复合膜联合应用更有利于骨缺损修复。