海产品中生物胺高通量检测体系的建立与应用

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生物胺属于低分子量的含氮有机化合物,较为广泛地存在于食品中,尤其是蛋白质丰富的食品。在肉制品、水产品等蛋白含量丰富的食品中,由相关微生物产生的酶,催化脱去游离氨基酸的羧基而产生,因此生物胺含量与其质量密切相关,是评价此类食品鲜度的一个重要指标。适量的生物胺在机体的生理活动中起到重要的调节作用,例如调控体温、控制胃部的pH和容积,调节人类的情绪,而多胺在体内蛋白质、RNA和DNA合成过程中扮演重要的角色。但是过量生物胺被人体吸收后,会产生一系列不适反应,引起头晕、呼吸困难、心跳不稳、血压突升降等不良症状,最近的研究表明重病的病人体内的生物胺比一般健康人群的指标偏高。生物胺因为存在潜在的毒性,吸收过量将会对人的健康产生比较严重的恶危害,且生物胺含量与海产品的质量(特别是新鲜度)具有较大的关联。目前食品中生物胺的研究已经成为热点问题,对其进行研究和检测可以提高和改善食品的质量及安全性。目前生物胺的检测方法主要有气相色谱法、毛细管色谱法、离子色谱法、反相高效液相色谱法和液相色谱质谱联用的方法。本文比较分析了柱前衍生高效液相色谱法和柱后衍生离子色谱法。采用柱前衍生高效液相色谱法进行生物胺的检测时,由于生物胺自身没有荧光特性和特异的紫外吸收基团,一般需要衍生,过程比较繁琐。离子色谱法以阴离子交换原理进行生物胺的分离,脉冲积分安培(PDA)电化学检测器对生物胺进行直接检测,方法简便,且灵敏度高,更适于推广应用。本文主要建立了离子交换色谱-柱后加碱脉冲积分安培检测法测定冷冻海产品中多巴胺、酪胺、5-羟色胺、腐胺、尸胺、组胺、胍基丁胺、苯乙胺、亚精胺、精胺等10种生物胺的方法。样品经酸溶液提取离心后,在IonPacCS18分析柱和IonPacCG18保护柱分离,梯度变化的甲基磺酸(MSA)作为淋洗液,流速1.3ml/min,柱温40℃,柱后加入0.1mol/L的NaOH碱溶液作为衍生试剂,脉冲积分安培检测器检测。结果表明,十种生物胺都能达到基线分离,在一定的浓度范围内,线性关系好,检出限在50μg/kg以内,回收率在86.0%-108.0%之间,样品的保留时间和峰面积的RSD分别小于1%和5%RSD(n=7)。该方法适用于冷冻海产品中不同种类生物胺的分离测定。
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