中国鲎鲎素的分离提取及其生物活性测定

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鲎,又名马蹄蟹,是一种中国拥有的极其珍贵的海洋动物资源.在动物界面屈指可数的活化石中,它是经济价值和科研价值最高的一个种类.在它的蓝色血液中蕴藏着丰富的生物活性物质,因而具有很好的开发应用前景.实验材料中国鲎从厦门市场购得,以20mH的茶碱为抗凝剂直接心脏穿刺法取血.采用1000rpm冷冻离心分离得出鲎血细胞,经Sephadex G-50凝胶层析与CM-Sepharose CL-6B离子交换层析等方法,从鲎血细胞保分离提纯鲎素.检查测定鲎素的抗细菌性和抗肿瘤活性.结果如下:1.抗细菌活性实验:体外(in vitro)实验表明,鲎素在较低浓度下就可抑制革兰氏阴性菌(大肠杆菌、氧化绿脓杆菌)和革兰氏阳性菌(枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌)的生长.其中金黄色素葡萄球菌(人体致病菌)相对于其它三种菌以鲎素更为敏感.由此可知,鲎素是鲎血细胞用以抵抗人侵微生物的自我防御系统的主要组份;2.体内(in,vivo)急性毒理实验:用小白鼠为实验动物,以腹腔注射和皮下注射两种方式给药所进行的鲎素活性体急性毒理实验表明,在给药量高达80μg/ml时,小白鼠仍能活跃生活,除皮下注射组在最高给药量80μg/ml时,个别小鼠有脱毛等现象外,并未观察到其它异常生理现象发生,说明鲎素对正常活性毒性较小,可用于活体实验使用;3.抗肿瘤活性实验:抗肿瘤实验表明鲎素对裸鼠皮下接种的HL-60肿瘤细胞有一定抑制作用,肿瘤抑制率约为42.3%.与对照组相比较,经鲎素皮下注射和腹腔注射处理肿瘤细胞形态学变化表明,肿瘤细胞明显出现空泡化、细胞器毁坏、核固缩等损伤及死亡的变化.这说明鲎素在经过裸鼠体内正常代谢过程后,仍保持生物活性性质的稳定,对肿瘤细胞具有靶向杀伤作用和效果.
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