论文部分内容阅读
目的 ①观察曲张大隐静脉(varicose great saphenous，VGS)管壁的光镜结构和超微结构的改变；②观察曲张大隐静脉管壁内弹性纤维(elastic fiber，EF)及胶原纤维(collagenous fiber，CF)的分布及变化；③观察曲张大隐静脉中溶酶体半胱氨酸蛋白酶(cysteine protease)中组织蛋白酶(cathepsin，Cat)L、S、K、B及其抑制剂Cystatin C的表达变化；④探讨Cat L、Cat S、Cat K、Cat B及CystatinC与大隐静脉曲张发病机制的关系。方法通过临床术中收集曲张大隐静脉31例，正常大隐静脉23例。标本获取后制成超薄切片置透射电镜(transmission electron microscrope，TEM)下观察超微结构变化；制成石蜡切片分别进行HE染色、Weigert染色、免疫组织化学SABC方法染色，在光镜下观察一般组织学变化及Cat L、Cat S、Cat K、Cat B、Cystatin C的表达变化；同时进行荧光免疫组织化学方法染色，观察上述组织蛋白酶与静脉壁细胞型的共定位；应用计算机图像分析系统对免疫组化结果进行定量分析，比较两组大隐静脉管壁中组织蛋白酶平均光密度值(mean optical density，MOD)，用SPSS12.0软件系统分析实验结果。结果①在HE染色切片中，正常大隐静脉内膜薄，腔面光滑平整：中膜内有长梭形平滑肌细胞(smooth muscle cell，SMC)，呈环形层状排列；外膜较厚。曲张大隐静脉显示内腔直径增大，内膜增厚，部分内皮细胞(endothelial cell，EC)不完整；中膜增厚，SMC形态异常，排列紊乱：外膜与正常大隐静脉比较无明显改变。②在Weigert染色切片中，正常大隐静脉管壁内EF呈连续的细丝波浪状，中膜SMC与EF、CF相邻呈多层环状分布；外膜中丰富的CF与EF排列规则。曲张大隐静脉管壁内EF明显减少，部分断裂，排列紊乱，CF减少不甚明显，外膜中CF与EF均失去环层状外观。③电镜下，正常大隐静脉内膜表面EC结构清晰，细胞间连接紧密；SMC呈梭形，胞浆内富含大量肌丝；胶原原纤维分布于中膜和外膜，排列规则。曲张大隐静脉内膜增厚，可见皱襞，EC内有大量小泡，表面呈微绒毛样改变，细胞间连