拟南芥kd361突变体的生殖缺陷和分子遗传研究

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植物雌雄配子发育、双受精与胚胎发育是植物有性生殖的关键步骤。实验室从拟南芥(Arabidopsisthaliana)Ds(Dissociation)突变体库中获得一偏离孟德尔分离常数的突变体kd361。角果中种子败育32.78%,雌和雄配子传递率39.91%与48.81%。雌配子体在胚囊发育末期,有17.26%极核不能融合为中央细胞;雄配子体在传粉后,花粉萌发正常但花粉管在体伸长能力不如野生型强;胚胎发育至前球形胚时期,观察到36.13%胚胎败育。TAIL-PCR和分子遗传分析将Ds定位至四号染色体,并使At4g00380和At4g00730之间39个连续基因片段丢失。研究缺失基因发现At4g00620基因两等位突变体sail720g12、salk141636与kd361种子败育表型一致,后证明该突变为纯合胚胎致死,败育率25.55%。分子互补结果是,At4g00620基因可完全互补等位缺陷,并能使kd361种子败育降低至23.15%,但实验无法获得Ds纯合植株。进一步实验发现,kd361转基因纯合植株后代雌配子传递率由39.91%上升至80%以上,雄配子传递率未发生改变。由此说明,kd361缺陷受到该基因调节外,还受其他基因重要控制。At4g00620是一参与叶酸合成与代谢的氨基酸脱氢酶基因,通过分子互补实验后首次发现,植物早期胚胎发育中叶酸合成与代谢受阻,直接引起后代1/4胚胎败育,严重影响到作物产量。
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