本论文以L-异亮氨酸产生菌钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)AS1.542为实验材料，通过对钝齿棒杆菌(C．crenatum)AS1.542原生质体制备影响因素的研究，确定了原生质体制备的最佳条件，对原生质体再生条件进行探索，创建并完善了棒杆菌原生质体制备和再生技术；利用氮离子注入AS1.542及其原生质体，对其注入方法进行摸索和改进，并对其诱变效应进行初步探讨，以期能为育种基础理论的研究和生产实践提供更多的帮助。 实验结果表明，钝齿棒杆菌(C．crenatum)AS1.542原生质体制备时，对菌体预处理的适宜条件为：斜面菌种转接液体完全培养基，30℃、200rpm摇瓶培养11h，按4％的接种量转接后培养2.5h，加入青霉素使其终浓度达到0.8u／ml，继续培养2h。取培养液5ml离心，用高渗液洗涤后加入溶菌酶进行处理，用于制备原生质体。通过对溶菌酶处理条件的摸索，确定使用溶菌酶的最佳条件为：lg／L的溶菌酶在酶解温度为37℃、摇床转速为150rpm条件下，处理15h。菌体原生质体形成率为95％以上，再生率为6.2％。 采用能量为30KeV的低能氮离子以不同剂量对制备好的原生质体进行离子注入，与同样注入条件下对AS1.542菌体进行氮离子注入相比，随着注入剂量的增加，其存活曲线都呈现先下降后上升再下降的趋势；但也存在明显的不同之处：其一，两者的突变率有差异；氮离子注入AS1.542原生质体的总突变率和正变率均高于其注入AS1.542菌体。可能是由于前者比后者对离子注入更敏感，所以导致更多的突变。其二，离子注入原生质体存活曲线的峰值出现较早，出现峰值的存活率也较高。是否存在这种现象还有待于进一步实验验证。可能是原生质体虽然没有细胞壁的保护，却受到0.5mol／L的蔗糖的有力保护，因此存活率要高。