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本试验旨在研究早熟和晚熟母猪品种(梅山和长大母猪)繁殖轴(下丘脑-垂体-卵巢组织)kiss1/GPR54基因表达差异及其激素的变化,并进一步考察日粮能量水平对晚熟品种母猪初情启动的影响。研究内容如下:试验一、分别选取70日龄、初情启动的梅山和长大母猪(n=4),采用ELISA法测定母猪血液中Leptin和E2水平,采用RT-PCR法克隆两品种Kiss1基因序列,荧光定量PCR法检测母猪繁殖轴上Kiss1/GPR54基因,下丘脑LeptinR和ERα,以及卵巢上LHR基因表达的情况。结果发现:(1)基因分析发现,梅山和长大母猪品种Kiss1基因序列一致。(2)梅山和长大母猪平均初情日龄分别为100天和199天,梅山母猪繁殖轴Kiss1表达量显著高于长大母猪(P<0.05),但受体GPR54 mRNA表达量差异不显著(P>0.5)。两个品种母猪繁殖轴Kissl/GPR54 mRNA表达量均随其日龄增加而升高(P<0.05)。(3)梅山母猪血液中Leptin浓度在70日龄时显著高于长大母猪(P<0.05),但初情启动时差异不显著(P>0.05);梅山猪血液中E2浓度初情启动时显著高于长大母猪,70日龄未发现两品种存在差异(P>0.05);随日龄的增加,母猪血液中leptin和E2浓度都显著升高(P<0.05)。(4)基因检测发现,梅山母猪下丘脑ERa mRNA表达显著高于长大母猪(P<0.05);而下丘脑LeptinR mRNA表达量仅显著高于70日龄长大母猪(P<0.05),初情时LeptinR mRNA表达量无显著差异(P>0.05);梅山母猪卵巢LHR mRNA表达量显著高于70日龄与初情长大母猪(P<0.05);两品种母猪下丘脑LeptinR、ERαmRNA及卵巢LHR mRNA表达量均随其日龄增加而升高(P<0.05)。(5) Person相关性分析发现,除卵巢上GPR54基因外(P>0.05),母猪血液中leptin水平与HPG轴上Kissl和GPR54基因表达之间存在显著正相关关系(P<0.05)。除下丘脑Kissl基因外(P<0.05),母猪血液中E2水平与HPG轴上Kissl和GPR54基因表达之间不存在显著正相关关系(P>0.05)。试验二、选取体重50±4.5kg,日龄和体况相近的LY母猪20头,按照配对试验设计原则分配到两个处理组,能量限饲组和NRC水平组(10个重复/处理,每个重复/1头猪)。NRC水平组日粮能量水平参照NRC(1998)后备母猪推荐水平,能量限饲组能量供给为NRC水平组70%,其它养分摄入量均一致。母猪50 kg,80 kg,100kg和初情启动时收集血液,采用ELISA法测定血液中E2和leptin水平。母猪超过80 kg后,每天两次进行发情观察,母猪首次出现阴户红肿并伴有稀薄粘液定义为初情启动。分别考察两个处理组母猪的初情日龄以及初情期的体重和P2点背膘厚度,结果如下:(6)与能量限饲组相比,NRC水平组母猪能及早启动初情期(177.7±3.4 d VS 190.1±10.2d, P<0.05),并具有较高的初情体重、日增重和P2背膘厚度(122.6±7.3kg VS 108.4±4.1 kg、0.85±0.02 kg/d VS 0.65±0.15 kg/d和13.50±1.38 mm VS 10.57±1.27mm; P<0.05)(7)母猪血液中Leptin和E2水平随日龄的增加而提高,母猪在100kg阶段和初情期时显著高于50kg和80kg体重阶段(P<0.05);能量水平对80kg后母猪血液Leptin和E2水平有影响,能量限饲组显著低于NRC水平组(P<0.05)。同时NRC水平组母猪下丘脑Kiss1基因表达量显著高于能量限饲组(P<0.05),但两能量水平组GPR54基因表达无显著差异(P>0.05)。根据以上结果,可以得到以下结论:(1)梅山与LY母猪Kiss1基因序列一致,但母猪不同品种和日龄在繁殖轴上kiss1基因的表达存在差异,繁殖轴kiss1的高度表达有利于促发母猪初情启动;(2)母猪血液中高Leptin和E2水平可上调繁殖轴Kiss1基因表达,梅山母猪血液中高Leptin和E2水平有利于其初情及早启动,日粮高能量水平可提高母猪血液Leptin和E2水平而促发初情的启动。