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睾丸间质细胞(Leydig cells)是睾丸中重要的特异性细胞,除了分泌睾酮和参与精子形成等基本功能外,其分泌的免疫活性因子可参与睾丸局部微环境的调节。脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)是革兰阴性菌的主要致病因子,通过激活相关炎症通路诱导炎症反应。睾丸间质细胞炎症损伤必定会影响种公畜的繁殖性能,传统治疗主要采用抗生素进行治疗,随着对抗生素使用的限制,天然植物提取物日益受到关注。白藜芦醇(Resveratrol,RES)是一种天然的多酚类植物抗毒素,具有抗菌、抗癌、抗衰老和抗凋亡等多种生物学活性。本研究通过LPS诱导细胞炎症损伤,并用RES对炎症损伤细胞进行干预,探讨白藜芦醇的抗炎作用效果及可能的作用机制,所获得的结果如下:1.通过MTS和iCELLigence实时无标记细胞功能分析仪监测发现,5μg/mL的LPS处理12 h后,可显著抑制猪Leydig细胞的增殖;利用RT-q PCR检测发现,相比于正常对照细胞,LPS诱导后可促进细胞中促炎因子TNF-α和IL-6的表达,抑制抗炎因子GAS6和TGF-β1的表达,说明浓度为5μg/mL的LPS作用Leydig细胞12 h可使猪Leydig细胞发生炎症损伤。2.用RES对炎症损伤猪Leydig细胞进行干预处理后,可在一定程度上抑制由LPS所引起的炎症损伤。主要表现在:RES处理可显著提高炎症损伤细胞的活力;减少细胞的凋亡;抑制促炎因子TNF-α和IL-6的表达,并促进抗炎因子GAS6和TGF-β1的表达;另外,RES处理可显著提高炎症损伤Leydig细胞中类固醇合成酶(StAR、P450scc和3β-HSD)的表达,并提高细胞分泌睾酮的能力。3.进一步采用Western Blot检测发现,RES在一定程度可上调炎症损伤猪Leydig细胞中抗凋亡因子Bcl-2的表达并抑制促凋亡因子Bax的表达;并通过调控NF-κB和Akt通路,使p65和Akt磷酸化水平显著降低,说明LPS可能通过调控NF-κB和Akt通路而发挥抗炎抗凋亡作用。综上,RES对炎症损伤猪Leydig细胞中部分促-抗炎症因子有平衡作用,同时增强其分泌睾酮的能力;RES对LPS所致炎症损伤细胞的调节作用可能通过抑制NF-κB和Akt通路中部分因子的磷酸化而实现,使猪Leydig细胞维持局部微环境的稳定。以上研究为开发RES替代饲用抗生素或抗炎药物提供理论依据。