大鼠肝移植后颗粒酶B mRNA的表达与急性排斥反应的关系

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目的:探讨大鼠肝移植后肝组织、外周血和胆汁中颗粒酶B mRNA的表达变化与急性排斥反应的关系,评价术后检测颗粒酶B mRNA的表达对早期诊断急性排斥反应发生的价值。方法:首先在Kamada报道的袖套法肝移植模型基础上加以改进建立大鼠原位肝移植胆道T管引流模型。实验动物分为四组,A组:正常对照组,对Wistar大鼠单纯进行胆汁引流,n=20;B组:同种同基因组,供受体同为Wistar大鼠,n=30;C组:急性排斥反应组(SD→Wistar大鼠),术后给予免疫抑制剂CsA 5mg/(kg·d),n=30;D组:急性排斥反应组(SD→Wistar大鼠),n=30。各组分别在术后第1、3、5、7、10天随机处死动物,A组4只,B、C、D组各6只,取外周血和肝组织。用RT-PCR方法检测颗粒酶B mRNA水平,肝组织做病理学检查。术后1、3、5、7、10天各取胆汁1ml,用RT-PCR方法检测颗粒酶B mRNA水平。经SPSS11.5统计软件进行Fisher精确检验。结果:大鼠肝移植后D组肝组织和外周血自术后3天起可以检测到颗粒酶B mRNA的表达,颗粒酶B mRNA的表达在术后第3、5、7、10天与其他组相比有显著统计学差异。各组在胆汁中均未检测到颗粒酶B mRNA的表达。D组急性排斥表现与病理学检查相吻合。结论:大鼠肝移植后排斥组肝组织和外周血内自术后3天起可以检测到颗粒酶BmRNA的表达;非排斥组未见其表达;而术后使用免疫抑制剂可抑制其表达。各组在胆汁中均未检测到颗粒酶B mRNA的表达。肝移植术后检测颗粒酶B mRNA的表达,可以为早期发现急性排斥反应的发生提供诊断依据,而从外周血中检测其表达可以提供一种急性排斥反应早期诊断和检测的方法。
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