获得性漏斗胸大鼠膈肌肌凝蛋白重链变化的实验研究

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目的:通过检测获得性漏斗胸大鼠膈肌肌凝蛋白重链MyHC—Ⅱa含量的变化,探讨膈肌肌凝蛋白在获得性漏斗胸发生发展中的作用。 方法:选用4周龄SD大鼠72只,随机分为三组,每组24只,其中第一组从胸骨旁切断下位三对肋软骨(肋软骨组),第二组经右侧膈肌脏面向肌性部分注射95%乙醇造成局部物理损伤(膈肌组),第三组为对照组,不做任何干预,作为空白对照。术后2周、4周和8周为观察时间点,各时间点每组各处死大鼠8只,收集膈肌,提取肌凝蛋白,应用十二烷基磺酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)对提取的蛋白的组成进行分析。将SDS—PAGE电泳结果转膜,并作Western—blot检测鉴定。Western—blot检测结果作光密度半定量分析,MyHC—Ⅱa的含量用光密度值来表示,结果采用方差检验进行统计学分析。 结果:两实验处理组动物均呈现前胸壁凹陷畸形。测得各组各时间点膈肌MyHC—Ⅱa的光密度值分别为:肋软骨组2周7.34±1.92,4周5.70±2.03,8周5.85±2.51,膈肌组2周4.08±1.74,4周4.21±1.57,8周4.0±1.6,空白对照组2周13.79±2.83,4周15.11±2.56,8周15.8±2.42。MyHC—Ⅱa光密度值测得结果经统计学分析,两实验处理组与对照组组间比较,各时间点MyHC—Ⅱa表达的差异有显著性,实验处理组的MyHC—Ⅱa表达较对照组减少,但在两实验处理组间比较,仅2周时MyHC—Ⅱa表达差异有显著性,膈肌组MyHC—Ⅱa表达减少,而在实验处理组间4周和8周时比较及各实验组自身对照各时间点MyHC—Ⅱa表达的差异均无统计学意义。 结论:在获得性漏斗胸动物模型基础上,改进膈肌肌凝蛋白提取及分离方法,利用Western—blot检测MyHC—Ⅱa。发现获得性漏斗胸动物膈肌肌凝蛋白重链MyHC—Ⅱa表达减少,说明在动物漏斗胸畸形形成过程中膈肌快型肌纤维成分减少,膈肌收缩力减弱。
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