【摘 要】
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随着工厂化栽培模式的推广以及市场需求的增加,杏鲍菇的产量大幅度上升,如何保持鲜菇采后的贮藏品质已成为杏鲍菇产业中的一个关键环节。我们前期的研究发现,低温贮藏下的杏
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随着工厂化栽培模式的推广以及市场需求的增加,杏鲍菇的产量大幅度上升,如何保持鲜菇采后的贮藏品质已成为杏鲍菇产业中的一个关键环节。我们前期的研究发现,低温贮藏下的杏鲍菇极易发生质地木质化劣变,显著影响了杏鲍菇的食用和商用价值。本论文在前期研究基础上克隆木质素生物合成过程中相关酶的基因,从理化和分子水平上分析不同调控对杏鲍菇采后两次木质化的影响,探讨两次木质化的诱因,为从分子水平上揭示杏鲍菇木质化的机理奠定基础。主要研究结果如下:(1)新鲜杏鲍菇在4℃不同气调(真空、5%氧气+10%二氧化碳+氮气、80%氧气+5%二氧化碳+氮气)下贮藏18天,分析不同气调调控对其质地性状、多酚等物质含量及抗氧化活性变化情况,结果表明:三种气调调控下杏鲍菇两次木质化的相关指标均发生了显著变化,其中CO2浓度能显著影响子实体硬度变化,高O2浓度显著影响子实体韧度变化。而且,不同气调条件能改变杏鲍菇采后典型的二次木质化特征;从总体上看,在第三天到第15天的贮藏期内杏鲍菇中多酚含量与木质化三个指标变化趋势呈正相关,但类黄酮的含量与木质化三个指标变化趋势呈负相关;(2)新鲜杏鲍菇在不同温度(1℃、4℃和8℃)下贮藏18天,分析低温调控对子实体木质素含量、硬度和韧性变化的影响,结果表明:杏鲍菇在不同低温调控的整个贮藏期间,子实体的木质素含量、硬度和韧性出现两次明显的增加,呈现出杏鲍菇典型的二次木质化现象。贮藏温度越低,其木质化三个指标的值越高,且第二次木质化程度均高于第一次。(3)利用RT-PCR法从杏鲍菇中克隆了四个木质素合成相关的基因序列,分别命名为Pe PLA1、Pe CAD1、Pe CAD2和Pe C4H。Pe PLA1基因CDS长度为2244bp,编码747个氨基酸;Pe CAD1基因CDS长度为1065bp,编码345个氨基酸;Pe CAD2基因CDS长度为1065bp,编码345个氨基酸;Pe C4H基因CDS长度为1623bp,编码540个氨基酸。(4)以β-actin为内参基因,运用荧光定量PCR技术分析实验室前期和本研究克隆得到的5个基因在不同温度调控下(1℃、4℃和8℃)杏鲍菇子实体不同部位及不同贮藏期的表达模式。荧光定量PCR结果显示,三种条件下所研究基因在菌盖、菌柄和菌尾三个部位都均有一定表达,Pe PLA1、Pe CAD1和Pe CAD2在三个部位中菌尾的表达量是最低的,而Pe PLA2在三个部位中菌尾的表达量是最高的。三种调控条件下的贮藏时间内Pe PLA1基因和Pe C4H基因具有相似的表达模式(升-降-升-降),其表达水平曲线与木质素含量、硬度和韧性变化趋势具有正相关性。在3-18天内,Pe CAD1基因和Pe CAD2基因的表达模式变化趋势与木质化指标具有正相关性。
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