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目的:磷酸二醋酶(phosphodiesterase,PDEs)是一类多基因大家族酶,至少包括11个家族22个亚型,负责水解细胞内环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)多种信号传递和生理活动。PDE4对细胞内cAMP浓度及其下游信号传导具有重要的调控作用。近年来,PDE4抑制剂在治疗哮喘,慢性阻塞性肺疾病(COPD)以及脊髓损伤,阿尔兹海默病等中枢神经系统损伤中发挥了重要作用。天然产物一直是防病治病药物的主要来源,在针对神经退行性疾病方面有着悠久的历史和坚实的基础。因此,从天然产物中寻找高效低毒且选择性强的PDEs活性抑制成分越来越受到科学家的重视。倒心盾翅藤系金虎尾科盾翅藤属倒心盾翅藤(Aspidopterys obcordata Hemsl.)的干燥藤茎,具有消炎利尿,清热排石之功效。本课题前期研究发现其醇提物具有一定程度的PDE4抑制作用,在活性指导下对其乙酸乙酯相、正丁醇相开展系统的化学成分研究,发现其PDE4抑制活性成分。为后续该植物的进一步开发利用提供参考。方法:采用95%乙醇对倒心盾翅藤干燥藤茎进行提取。在活性指导下,运用硅胶柱色谱、凝胶LH-20柱色谱、ODS柱色谱、制备液相色谱等多种分离手段,对具有PDE4抑制活性的组分进行系统化学成分分离,经现代波谱分析(IR、UV、NMR、MS、旋光、CD等)以及物理常数对照等方法鉴定化合物。运用[3H]标记液体闪烁计数法对所得化合物进行体外PDE4抑制活性测试。结果:本实验对倒心盾翅藤的95%乙醇粗提物以及各萃取相进行PDE4的体外活性测试,结果表明:在试药浓度为1mg/mL下,其粗提物抑制率为68.7%,具有一定程度的抑制活性。各个萃取相的活性测试结果显示:在试药浓度1mg/mL下,乙酸乙酯相和正丁醇相的抑制率分别为7.1%和62.4%,正丁醇相表现出了一定程度的PDE4抑制作用。从乙酸乙酯相和正丁醇相分离得到29个化合物,包括9个苯丙素类化合物(1、5、21、23、24、25、27、28、39);3 个甾体类化合物(3、6、13);1 个萜类(26);2个酚酸类化合物(2,4);9个苯酚衍生物类(8、10、11、14、15、16、17、20、22);4个生物碱类化合物(9、12、18、19);1个黄酮类化合物(7)。分别为:N-benzoyl-L-phenylalaninyl-N-benzoyl-phenylalaninate(1),3,4-二羟基苯甲酸(2),3β,6α-二羟基豆甾烷(3),3,4-Dihydroxyphenyl acetate(4),lyoniresinol(5),胡萝卜苷(6),儿茶素(7),3,4-二羟基苯甲酸-3-O-α-L-鼠李糖苷(8),(α-D-吡喃葡萄糖基)-3-异恶唑啉-5-酮(9),cinnacasolide C(10),2,6-二甲氧基-1-羟基-4-葡萄糖基(11),尿囊素(12),β-谷甾醇(13),2,4,6-三甲氧基-1-O-β-D-葡萄糖苷(14),3,4-二羟基苯甲酸-4-O-α-L-鼠李糖苷(15),2,6-二甲氧基-4-羟基-1-葡萄糖苷(16),1,2,4-三羟基苯酚-1-O-α-L-鼠李糖苷 17),1-β-D-rifuranosy-1,2,4-triazole(18),尿喃啶苷(19),rhyncoside C(20),刺 五 加 苷 B(21),1-(α-L-rhamnosyl(1-6)-β-D-glucopyranosylosy)-3,4,5-trimethoxybenzene(22),3-hydroxy-2-[4-(3-hydroxypropyl)-2-methoxyphenoxy]propyl β-D-glucopyranoside(23),3-hydroxy-2-[4-(3-hydroxypropyl)-2-methoxyphenoxy]propylβ-D-glucopyranoside(24),lyoniresinol-4-O-β-葡萄糖基(25),(6R,9S)-3-oxo-α-ionol apiofuranosylglucopy-ranoside(26),Lyoniresinol-4-O-α-L-鼠李糖基-9’-O-β-D-葡萄糖基(27),Lyonside(28),Nudiposide(29).运用[3H]标记液体闪烁计数法对其中13个化合物进行体外PDE4抑制活性测试,药理活性测试结果显示化合物7(儿茶素)具有显著的抑制作用,10 μM的试药浓度下对PDE4的抑制率为90%。化合物5、14、18、28、29在10μM的试药浓度下对PDE4的抑制率在50%左右,显示了一定程度的抑制活性。结论:倒心盾翅藤粗提物和各个萃取相均具有不同程度的PDE4抑制活性。从倒心盾翅藤乙酸乙酯相和正丁醇相分离得到的29个化合物中,除了 3、6、13,其余均是首次从该植物中分离得到。其中化合物8、15、17、27为新化合物。所得化合物的PDE4活性测试结果显示,化合物7(儿茶素)具有显著的PDE4抑制活性。