农杆菌介导获得可去除选择标记的转CpTI抗虫基因玉米植株

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本实验将经过修饰的CpTI抗虫基因和hyg选择标记基因分别置于MAR序列之间,使用根癌农杆菌超级双元载体转化生产上广泛应用的优良玉米自交系18-599的胚性愈伤组织。共培养3天后,在含HygB的培养基上连续筛选3代,然后分化得到再生植株。PCR扩增、PCR-Dot blotting和PCR-Southern blotting检测初步证明目的基因已经整合到再生玉米植株中。此外,本实验还探讨了共培养温度、共培养培养基的pH及其它因素对转化效率的影响。 实验结论如下:
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