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我国最近几年海水养殖业得到了迅速发展,成为世界水产养殖第一大国,这样对适用于海水养殖动物的饲料需求量也大大增加,但是目前还没有一种非常适合于海水养殖动物的饲料。虽然鱼粉在水产动物的配饵中常作为主要的动物蛋白源。但是随着养殖业的日益发展,鱼粉需要量急剧增加,以至鱼粉供应紧缺,价格年年上涨,成为制约水产养殖业发展的重要因素,为了解决鱼粉供应紧张,找到更好的海水养殖动物饲料,本人进行了高蛋白海洋酵母的筛选,并通过分析其氨基酸组成,核酸含量组成,脂肪酸组成等,找出适合水产养殖动物的高蛋白海洋酵母作为单细胞蛋白饲料。本试验采用凯氏定氮法测定了327株海洋酵母的粗蛋白含量,从中选择了8株高蛋白海洋酵母作为单细胞蛋白源的候选,这8株菌的生物量(g/l)及蛋白质含量(w/w)分别为:YA03a:2.1,57.4;W6b:3.5,49.8;N3c:7.1,42.5;N11b:8.1,40.4;G7a:5.3,41.4; N17:9.3,39.2;G7b:2.9,33.5;4#2:7.9,30.4。又通过生理生化和分子生物学方法对这8株高蛋白海洋酵母进行了多样性研究,经过鉴定发现这8株菌属于6个属,多样性很丰富。这8株菌的最后鉴定结果如下:W6b属于拉考夫梅奇氏酵母(Metschnikowa reukaufii),G7a属于金黄色隐球酵母(Cryptococus aureus),G7b和4#2属于普鲁兰类酵母(Aureobasidium pullulans),N3c和N11b属于解脂亚罗酵母(Yarrowia lipolytica),N17属于热带假丝酵母(Candida tropicalis),YA03a属于有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum),目前还没有查到关于高蛋白海洋酵母多样性研究的资料。随后我们又分析了这8株菌的营养组分,包括核酸含量测定、脂肪酸组分分析、以及氨基酸组分分析。结果表明这8株菌的核酸含量在2.3-7.8%之间,均小于11%,符合作为单细胞蛋白的核酸标准。这8株海洋酵母的脂肪酸组分除了YA03a是以C16:1为主外,其它7株菌的脂肪酸组分都以C18:0和C18:1为主,它们均缺乏海洋动物生长必需的两种多不饱和脂肪酸C 20:5和C22:6,这些海洋酵母作为单细胞蛋白使用时需要添加富含这两种多不饱和脂肪酸的藻类。这8株海洋酵母均含有高水平的必需氨基酸组分,尤其是海洋动物生长所必需的赖氨酸和亮氨酸含量很高。通过多样性分析以及氨基酸组分分析我们发现高蛋白海洋酵母G7a蛋白质含量高,核酸含量低,碳源利用范围广,且具有菊糖酶活性,因此我们选择菌株G7a作为下一步研究对象,对它的培养基组分及培养条件进行了优化,优化结果如下:最佳培养基组分为:6.0%的菊芋汁+4.0%的豆饼粉水解液,最佳培养条件为:28℃,pH5。并通过2l发酵罐试验测定了最佳培养基组分和培养条件下的生物量为10.1g/l,蛋白质含量为53.0%,最佳培养时间为56h,且此时培养基中只剩下0.051% (w/v)的还原糖和0.072% (w/v)的总糖,菌株G7a用掉了培养基中96%的糖,糖的利用率很高。此时,G7a的核酸含量为2.1%(w/w),细胞含有大量的C16:0 (19.0%), C18:0 (46.3%)和C18:1 (33.3%)脂肪酸,必需氨基酸水平很高,尤其是赖氨酸(12.6%)和亮氨酸(9.1%),G7a细胞还有对海洋动物生长很重要的Vc(2.2mg/100g)。因为酵母细胞的细胞壁厚,海洋动物的肠道短且没有消化酵母细胞壁的酶,若想提高该单细胞蛋白的生物利用率,必须在用作单细胞蛋白之前使它们的蛋白质尽量的释放出来,因此我们又对G7a进行了温度敏感自溶突变株的研究。按照Cabib等(1975)以及R.Gonzalez等(2003)的方法选择了一株理想的温度敏感自溶突变株G47,获得该自溶突变株最佳自溶时间为30min,每毫升菌体(108cells/ml)所释放出来的蛋白质为2.89mg,通过计算得出自溶突变株G47的蛋白质释放率为44.1%。且G47的生物量(9.8g/l)和蛋白质含量(53.6%)与野生菌株G7a相比并没有发生大的变化。说明菌株G47依然是个高蛋白海洋酵母。总而言之,海洋酵母G7a和它的自溶突变株G47作为海洋动物单细胞蛋白饲料的潜力非常大。