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背景与目的:
因肿瘤、创伤、先天性疾病等需切除部分气管,当切除超过6cm时难以端端吻合,临床工作中常可以遇到。由于长段气管缺损重建存在着再血管化、管腔支撑、上皮覆盖、排斥反应等难题,仍是临床尚未解决的难题。半个世纪以来,国内外学者进行了许多有益探索,仍未找到一种理想的替代材料。由于小肠来源丰富、再血管化容易,是一种较好的气管重建材料。虽然不少学者对小肠替代气管做过较深入的研究,但对小肠移植后的变化规律了解不多。本课题通过建立游离空肠重建气管缺损动物模型来重点研究:去部分黏膜游离空肠修复的组织学变化,为应用于临床提供实验依据。
方法:
选用国际通用标准实验动物beagle犬6条。氯胺酮静脉全麻下,截取一段4cm长的空肠段,带有5cm以上肠系膜动、静脉血管蒂。实验组有3条beagle犬,用10号手术刀片和纱布制成的粘膜擦除棒去掉部分空肠黏膜,对照组3条beagle犬,截取同样长空肠段,不去除空肠黏膜。从气管第3环至第10环靠右侧切除管周1/3,形成约4cm×1.2cm气管壁缺损,在第13至第15环沿正中切开气管壁,向两边切开约1cm,制成约1.5×1cm气管造瘘口。将游离空肠的肠系膜动脉和右侧颈总动脉行端侧显微血管吻合,肠系膜静脉与右侧颈内静脉行端端吻合,建立游离空肠重建气管部分缺损的模型。
术后观察beagle犬的一般状况、气管造瘘口愈合情况,术后分别于第1月、第2月、第3月、第6月四个时间点,在氯胺酮静脉全麻下行纤维支气管镜检查,观察移植空肠肠粘膜的颜色、血运,吻合口的愈合情况,有无肉芽及瘘道形成,新气道有无狭窄,塌陷,然后现场录象,最后在显示器直视下用活检钳取活检,每次分别于吻合口和移植空肠肠腔中部取活检。定位方法,由第一助手在气管造瘘口上方1cm处,靠右侧按压气管壁,使移植空肠突向气管腔,术者持纤维支气管镜确认移植空肠位置,第二助手持活检钳取活检,共取两份,一份立即放入2.5%戊二醛溶液固定后,4℃保存,送透射电镜观测。另一份放入4%甲醛溶液,常规石蜡包埋、切片、HE染色行光镜检查。术后6个月时,氯胺酮静脉全麻下,先行纤维支气管镜检查重建气道情况后,颈部术区备皮,常规消毒、铺无菌巾,气管造瘘口以上颈前正中切口,依次分离皮下组织,颈前带状肌、气管前筋膜至气管前壁,暴露原重建气管,观察与周围的粘连情况,有无脓肿形成,寻找原动静脉吻合处,沿第二气管环至造瘘口完整切除气管,然后立即用锋利的刮胡刀片在空肠黏膜面正中取1cm×1mm×1mm黏膜,立即放入2.5%戊二醛溶液固定后,4℃保存,送透射电镜观测。然后观察气管内腔有无狭窄,吻合口有无肉芽,沿后壁剪开气管,观察管腔黏膜面是否光滑,标本放入4%甲醛溶液,常规石蜡包埋、切片、HE染色行光镜检查。最后无痛处死beagle犬。
结论:
1.去部分黏膜游离空肠重建气管后,能有效减少分泌细胞数量,减少肠液分泌,促进气管愈合。
2.去部分黏膜游离空肠重建气管后,移植空肠腔术后2个月出现鳞状上皮化生,术后3个月出现假复层纤毛柱状上皮化生,术后6个月完全被假复层纤毛柱状上皮覆盖。
3.不去粘膜游离空肠重建气管后,移植空肠黏膜层逐渐变薄,肠腺萎缩,术后3个月出现部分鳞状上皮化生,术后6个月出现假复层纤毛柱状上皮化生。
4.去部分粘膜游离空肠重建气管,能加速肠粘膜腺上皮化生为假复层纤毛柱状上皮,为应用于临床提供了实验依据。