论文部分内容阅读
帕金森病(PD)的主要病理改变是中脑黑质多巴胺(DA)能神经元的变性和死亡,目前对PD的治疗仍以控制症状为主,尚无有效方法缓解病情进展,药物的副作用更是严重影响治疗效果。绞股蓝早已广泛应用于中医方剂,长期食用无毒副作用。研究显示绞股蓝中提取的多种有效成分作为抗氧化剂的神经保护作用很多。我们希望通过检测绞股蓝皂苷(GPs)对体外培养原代中脑神经细胞的保护作用,筛选最佳药物浓度和时间,观察其抗凋亡和抗氧化作用,GP为s用于临床治疗PD提供实验依据。目的:探讨GPs对原代培养的胚鼠中脑DA能神经细胞的保护作用。方法:原代培养胎鼠中脑腹侧神经细胞,分别应用100、200、400、800μg/mLGPs作用6h、12h、24h、48h、72h、96h,同时设空白对照组和阳性对照(NGF)组,应用MTT比色试验检测GPs对细胞活性的影响,筛选GPs最佳浓度和作用时间。免疫细胞化学染色检测抗酪氨酸羟化酶(TH)的表达;应用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导细胞损伤,同时设空白对照组和GPs预处理组,应用免疫细胞化学染色和流式细胞仪分别检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达和细胞凋亡。结果:MTT检测结果显示400μg/mLGPs作用48h后细胞吸光值为(1.006±0.062),与NGF组比较差异无统计学意义(P>0.05),与实验组比较差异有统计学意义(P<0.05)。TH免疫染色显示400μg/mLGPs组和NGF组TH阳性细胞数均高于空白对照组;iNOS免疫染色显示400μg/mLGPs预处理组iNOS阳性细胞数多于空白对照组,少于MPTP组;流式细胞仪检测显示400μg/mLGPs预处理组细胞凋亡率高于空白对照组,低于MPTP组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:400μg/mLGPs作用48h对MPTP诱导原代培养DA能神经细胞的损伤具有保护作用。