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二球悬铃木（Platanus acerifolia）是世界著名的行道树之一，具有树形雄伟挺拔、树干通直、茎干粗壮、生长迅速、枝多叶茂等优点。但是，每年3-4月份，其存在严重的“飞毛”现象，严重影响人们的生活。 本课题组为解决其飘毛的问题，在二球悬铃木花果发育方面进行了研究，试图建立以叶、合子胚、茎为受体的遗传转化体系，但是仍然面临着转化率低的瓶颈。由于体细胞胚相较其他组织、器官具有较好的接受外源DNA的能力，因此本实验主要致力于二球悬铃木体细胞胚的诱导。在试验过程中发现，二球悬铃木体胚的发生需要诱导出生长状态良好的愈伤。另外，在研究二球悬铃木花发育相关的基因时发现存在两个FT同源基因-PaFT和PaFTL，以及两个FD同源基因-PaFDL1和PaFDL2。且PaFT和PaFDL均存在选择性剪接的现象。本实验为进一步阐明其分子机制、生物学功能，将PaFTL，PaFT及其剪接型分别与PaFDL的剪接型双转化烟草，进行植株表型的观测。主要研究结果如下： 1．以未成熟的雄花序为受体，2,4-D、低温、甘露醇渗透处理三种预处理，结合MS+蔗糖30g/L+琼脂7.5g/L+NAA0.3mg/L+BA0.4mg/L；MS+蔗糖30g/L+琼脂7.5g/L+L-Glu500mg/L+CH500mg/L两种培养基均未能成功诱导出愈伤。 2．相较生长素、抗生素，只添加细胞分裂素的培养基可以诱导出雄花序愈伤组织，其中以添加TDZ0.05mg/L的培养基获得的愈伤生长状态最佳。培养时间超过1.5个月开始老化，在只添加NAA0.5mg/L的培养基上可以生长3-4个月，将其放置在MS上，黑暗培养可以增殖，培养时间超过1.5月开始老化。 3．在以成熟雌花序为外植体的愈伤诱导中发现，仅添加6-BA的培养基上的愈伤状态为米黄色，组织较为松散，优于只添加TDZ的培养基愈伤生长状态。不同基因型的植株，不同组织部位，都对细胞分裂素敏感，同时对不同的细胞分裂素种类响应不同。 4．PaFT-A、PaFDL双基因转化烟草植株表型观察结果如下：PaFT-A、PaFDL2-Ⅱ株系花期长于单转PaFT-A的株系，表现为花期的延长；PaFT-A、PaFDL1-Ⅱ株系花期极显著的长于单转PaFT-A的株系，表现为晚花性状。 5．PaFTL、PaFDL2-Ⅱ双转化烟草花期表型进行初步观察显示，在组培瓶阶段，与单转PaFTL相较，其有明显的主茎干，顶端优势明显增强，初步表现为晚花性状。 6．PaFT-F、PaFDL2-Ⅱ双转化草花期表型进行初步观察显示，与单转PaFT-F相比，均表现出晚花性状；PaFT-N、PaFDL1-Ⅱ和PaFT-N、PaFDL2-Ⅱ两种双转基因烟草花期表型观察，也都表现晚花性状。初步可见，PaFT-F、PaFT-N两种选择性剪接型在花期调控上作用不显著。