目的：鸟氨酸脱羧酶(Ornithine Decarboxylase，ODC)是细胞内多胺合成的限速酶，对控制细胞内多胺含量具有重要作用，由此成为当前抗肿瘤药物设计新的分子靶点。ODC在细胞内的表达水平的改变，会影响多种生长因子功能，刺激致癌基因的表达，并且会影响多胺水平，因此细胞内ODC的表达在转录、翻译和译后各阶段均受到严格调控。二氟甲基鸟氨酸（DFMO）是ODC不可逆抑制剂，其分子结构与鸟氨酸类似，能够竞争性地与该酶的活性中心结合而抑制ODC的活性，使多胺的合成减少。在II期临床试验中，DFMO由于使用剂量高并且毒副作用大而限制了它在抗肿瘤治疗中的应用。因此,筛选更高效且毒副作用小的新型ODC抑制剂有重要的临床意义。在前期的实验中，综合应用计算机模拟高通量筛选和分子、细胞水平上的验证实验，获得了一系列可以和ODC结合，并且明显抑制其活性的小分子，现阶段我们对小分子抑制ODC酶活的机制进行探索。　　方法：(1)在NCBI基因库中寻找荧光蛋白YPET、荧光蛋白CyPET、鼠源鸟氨酸脱羧酶ODC及其抗酶（AZ）序列，并将所得质粒的基因测序后与之进行序列比对。(2)利用所得原核表达质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）并表达目的蛋白，并利用亲和层析，分子筛等获得较高纯度的目的蛋白。(3)建立以荧光共振能量转移(FRET)为基础AZ和ODC的反应体系。(4)使用FRET体系检测小分子对AZ和ODC单体与二聚体之间亲和反应的影响。　　结果：(1)成功表达带有荧光标记蛋白CyPET-mAz和YPET-mODC。(2)以FRET为基础，建立CyPET-mAz和YPET-mODC的反应体系。(3)使用前期检测对ODC活性有明显影响的小分子，使用建立的FRET检测体系检测出四种小分子对ODC和AZ的亲和反应有影响。(4)发现低浓度的D4, D6, D24和D81号小分子可以抑制ODC和AZ的亲和反应，并且对药物有浓度依赖性。　　结论：通过计算机模拟、高通量筛选和分子生物学实验验证并筛选出一系列能有效抑制 ODC活性的小分子化合物，该化合物在低浓度下即可抑制肿瘤细胞生长。本研究成果将为肿瘤的基础研究和临床研究提供新的方法和手段，为新型靶向 ODC的抗肿瘤药物设计与筛选奠定基础。