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目的:研究右旋柠烯对人大肠癌细胞株的抗癌活性,通过描绘大肠癌细胞株在右旋柠烯的作用下的基因表达谱的改变,以明确右旋柠烯抗肿瘤的分子机制。
方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法、电镜、流式细胞术,对细胞凋亡的定性与定量指标进行检测。用含7 488个cDNA克隆的表达微阵列分析大肠癌细胞株LS174T在右旋柠烯的作用下mRNA表达的改变;用半定量RT-PCR验证cDNA表达微阵列检测的结果。
结果:经D-limonene处理的LS174T细胞出现核固缩,染色质边集,凋亡小体形成。凋亡细胞发生率与药物浓度呈正相关,即药物浓度为0.03~0.25μg/ml(48h),凋亡细胞的发生率从(3.81±0.95)%上升到(31.56±4.69)%。对于在两个样品中均有效表达的基因发生上下两倍变化的数据有247个,其中与对照组相比,在D-limonene处理组样品中表达上调的基因有161个,下调表达的基因有86个。与细胞增殖与凋亡,细胞因子及受体,细胞应激反应等功能相关的基因有比较明显的表达变化,另外具有明显的功能类型特征的是与组蛋白相关的基因表达的变化。
结论:D-limonene对人大肠癌细胞的杀伤主要是通过诱导细胞凋亡。其抗癌作用与肿瘤细胞多基因的表达变化相关。本研究揭示了大肠癌细胞株在右旋柠烯作用下基因表达谱的改变,为明确右旋柠烯抗肿瘤的分子机制提供了线索。