黄茶属于中国六大茶类之一,具有广阔的市场前景。近几年来,因其具有养胃、润肺、减肥和降脂的功效,逐渐引起了消费者的关注。对黄茶产品的感官品质特征和理化成分分析,能够为黄茶的生产和销售提供理论支持。随着生活节奏越来越快,饮食习惯不规律,以及在长期各种压力下,人体胃肠道疾病的发病率逐年上升。便秘是一种常见的人体胃肠道疾病,常伴随着肠道菌群紊乱的现象。饮食干预能够调节人体肠道微生物组成和分布,且安全有效受到了大众认可。本文用黄茶水提物对昆明小鼠进行灌胃处理,后期给与盐酸洛哌丁胺诱导便秘,分析小鼠的胃肠道功能和肠道微生物结构变化,阐述黄茶水提物预防便秘的作用机制。主要的研究结果如下:1.37个黄茶样品的感官品质及理化成分分析本研究收集2017年的37个黄茶样品,并对其进行感官审评,结果显示,原料嫩度、内含成分及加工工艺是影响黄茶色泽呈现的重要因素。黄茶的黄变程度能够反映内含物质的转变情况。同等嫩度原料黄变程度较低的样品,其滋味、香气和色泽接近绿茶,黄变程度适中的样品,其汤色金黄,滋味醇回甘,香气清高。样品的脂溶性色素含量结果显示,多叶型黄茶的类胡萝卜素和叶绿素a含量最高为48.04±14.71 mg/100g和38.89±6.06 mg/100g。样品的理化成分分析结果显示,紧压黄茶的茶多酚总量和可溶性糖含量最高分别为21.6±3.89%和9.15±1.05%。芽型黄茶的游离氨基酸含量最高为5.33±0.65%,其次是芽叶型黄茶为4.84±0.52%。黄酮含量在多叶型黄茶中最高为0.47±0.14%,在芽型黄茶中最低为0.15±0.07%。紧压黄茶的EGC、DL-C、EGCG和ECG含量最高,分别为1.79±0.55%、0.69±0.49%、4.85±1.27%和2.03±1.08%,GCG和EC含量在芽叶型黄茶中含量最高,分别为0.34±0.11%和2.69±0.67%。咖啡因在紧压黄茶中的含量最高为4.29±0.42%,在芽型黄茶中的含量最低为3.54±0.54%。芽叶型黄茶的茶氨酸含量最高为2.01±0.62%,其次是芽型黄茶为1.84±0.44%。果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖在紧压黄茶中的含量均最高分别为0.17±0.04%、0.2±0.07%、1.1±0.4%和2.53±0.84%。2.黄茶水提物的制备和成分分析选取芽叶型黄茶X14以及同等嫩度原料的绿茶和黑茶产品作为后续小鼠润肠通便研究的材料。茶叶采用沸水浸泡法提取茶汤,经冷冻干燥法制备茶叶水提物,并对其内含成分进行检测。绿茶、黄茶和黑茶水提物的茶多酚含量分别为44.35±0.63%、34.87±0.69%和25.09±0.75%。儿茶素组分EGCG、DL-C、GCG和ECG含量在绿茶水提物中含量最高分别为23.37%、1.16%、1.23%和5.03%,而GA、EGC和EC含量在黄茶水取物中含量最高分别为3.99%、6.71%和1.94%。绿茶、黄茶和黑茶水提物的游离氨基酸含量分别为6.65±0.09%、9.35±0.10%和4.10±0.05%,茶氨酸含量分别为0.97%、0.54%和0.26%。绿茶、黄茶和黑茶水提物可溶性糖含量分别为9.35±0.31%、13.46±0.59%和15.59±0.18%。黄茶水提物的蔗糖和麦芽糖含量最高分别为1.69%和5.58%,略高于黑茶水提物。绿茶、黄茶和黑茶水提物中咖啡因含量差异不大,分别为9.11%,8.36%和8.69%。3.黄茶水提物对小鼠便秘的预防作用110只昆明小鼠,设置为11组,分别为正常组（NC）、模型组（MI）;低剂量黄茶（YL）、绿茶（GL）和黑茶（DL）水提物组;低剂量和高剂量黄茶（YLI和YHI）、绿茶（GLI和GHI）和黑茶（DLI和DHI）水提物预防组。小鼠灌胃纯水（H2O）、黄茶、绿茶和黑茶水提物共5周,从第4周开始,模型组和预防组的小鼠灌胃盐酸洛哌丁胺诱导便秘2周。动物实验结果显示,与正常组比,灌胃黄茶、绿茶和黑茶水提物3周后,小鼠的排便量均显著提高（P＜0.05）。盐酸洛哌丁胺诱导便秘2周后,与模型组比较,黄茶、绿茶和黑茶水提物干预提高了小鼠的排便量、粪便含水量和胃肠道转运率,调节了小鼠血清中胃肠道活性肽水平,其中血管紧张素（VIP）含量显著降低（P＜0.05）,胃泌素（GAS）和内皮素（ET-1）含量增加,缓解了小鼠的便秘症状。此外,与正常组比,未诱导便秘的低剂量黄茶、绿茶和黑茶水提物组,小鼠的胃肠道转运率分别提高了17.03%、10.71%和15.57%。结肠形态学观察结果显示,高剂量黄茶、绿茶和黑茶水提物能够保护结肠组织。实时荧光定量q RT-PCR对结肠水通道基因（AQP3和AQP4）和胃肠动力5羟色胺基因（5-HT3和5-HT4）表达量进行了检测,结果表明,与模型组比较,灌胃黄茶、绿茶和黑茶水提物的小鼠AQP3和AQP4的表达量降低,而5-HT3和5-HT4的表达量增加。与正常组比较,未诱导便秘的低剂量黄茶、绿茶和黑茶水提物组中的小鼠结肠AQP3和AQP4的表达量无明显差异,而5-HT3和5-HT4的表达量提高。因此,黄茶、绿茶和黑茶水提物能够促进小鼠胃肠道蠕动,同时在便秘因素干扰时,能够促进小鼠胃肠道蠕动和调节小鼠结肠的保水能力,提高粪便的含水量来预防便秘。4.黄茶水提物调节小鼠肠道微生物预防便秘运用16S r DNA测序技术分析第3周末和第5周末小鼠粪便,通过生物信息学挖掘茶叶水提物、肠道微生物和便秘的相互关系,研究茶叶水提物调节肠道微生物,缓解便秘的机制。结果显示,黄茶、绿茶和黑茶水提物干预3周后,高剂量的黄茶和黑茶水提物组中的小鼠肠道微生物α多样性显著提高。β多样性分析显示,与正常组比,黄茶、绿茶和黑茶水提物组中的小鼠肠道微生物结构改变,呈剂量依赖关系。相对丰度前50的属与正常组进行两组比较,黄茶、绿茶和黑茶水提物干预提高了norankfMuribaculaceae,Eubacterium]coprostanoligenesgroup,unclassifiedfPrevotellaceae,norankoRhodospirillales的相关丰度,降低Alistipes,LachnospiraceaeUCG-001,norankfClostridialesvadin BB60group和Anaerotruncus的相关丰度;黄茶和绿茶水提物干预提高了norankoGastranaerophilales,降低了Desulfovibrio,Ruminiclostridium5,norankfPeptococcaceae,LachnospiraceaeNK4A136group,RuminococcaceaeUCG-004;绿茶和黑茶水提物干预降低了Ruminiclostridium,CandidatusSaccharimonas,unclassifiedfRuminococcaceae和Ruminococcus1的相对丰度;黄茶水提物干预提高了Lactobacillus的相对丰度;黄茶和黑茶水提物干预提高了Akkermansia的相关丰度。便秘诱导2周后,β多样性分析显示,盐酸洛哌丁胺诱导小鼠便秘,改变了小鼠肠道微生物结构,黄茶、绿茶和黑茶水提物在一定程度上改变了其对肠道微生物的作用,特别是高剂量黄茶和黑茶水提物。对相对丰度前50的属与模型组进行两组比较,黄茶、绿茶和黑茶水提物干预提高了Bifidobacterium,Faecalibaculum和RuminococcaceaeUCG-005的相对丰度;黄茶和黑茶水提物干预提高了LachnospiraceaeUCG-006,Ruminiclostridium9,Roseburia和Harryflintia的相对丰度,降低了Alloprevotella,unclassifiedoBacteroidales和Bacteroides的相对丰度;黑茶水提物干预提高了norankoGastranaerophilales,CandidatusSaccharimonas,Ruminiclostridium5,norankfRuminococcaceae,Intestinimonas和Desulfovibrio的相对含量;黄茶和绿茶水提物干预降低了norankfClostridialesvadin BB60group的相对丰度。Spearman相关性分析显示这些微生物与小鼠便秘表型指标之间具有极显著关联。这说明黄茶、绿茶和黑茶水提物调节小鼠肠道微生物结构,有益肠道健康,而高剂量黄茶和黑茶水提物能够调节在便秘因素干扰后的肠道微生物结构,从而缓解便秘引起的肠道菌群失调。