第一部分EPO通过其受体介导的PI3K/AKT通路改善肝脏胰岛素抵抗目的:近期研究发现促红细胞生成素（EPO）对小鼠脂肪组织和骨骼肌组织的糖代谢和胰岛素抵抗有明显的改善作用,但EPO对肝脏胰岛素抵抗有何作用及其机制尚不明确。本研究分别在细胞和动物水平研究EPO改善肝脏胰岛素抵抗的机制。方法和结果:我们研究发现EPO能够显著增加正常或高脂处理的HepG2细胞磷酯酰肌醇3激酶/蛋白激酶B（PI3K/AKT）活性以及糖原合成水平,而借助腺病毒介导的RNA干扰抑制HepG2细胞EPOR表达后,EPO的这种作用明显减弱。另外,给予高脂饮食诱导的肥胖小鼠2周EPO治疗后,小鼠空腹血糖较高脂对照组明显降低,而糖耐量和胰岛素耐量以及肝脏AKT、GSK3β和FOXO1磷酸化水平显著增加。结论:我们的结果表明EPO可通过EPOR介导的PI3K/AKT通路改善肝脏胰岛素抵抗。第二部分PPAR Y介导促红细胞生成素改善肝脏胰岛素抵抗的机制研究目的:研究表明促红细胞生成素（EPO）可明显改善糖代谢和胰岛素抵抗,过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）是调节肝脏糖脂代谢的一类重要的核转录因子。本文的研究目的是探讨PPARy是否介导了 EPO改善糖代谢和肝脏胰岛素抵抗的作用。方法和结果:我们研究发现EPO可增加高脂处理的HepG2细胞PPARy基因和蛋白表达以及PPAR蛋白乙酰化水平,使用腺病毒介导的RNA干扰抑制HepG2细胞EPOR表达后,EPO促进PPARy基因和蛋白表达的作用减弱。重要的是,PPARy抑制剂以及PPARy干扰明显减弱EPO促进HepG2细胞糖原合成以及增加AKT磷酸化的作用。而且,慢病毒介导的高脂喂养C57BL/6小鼠肝脏特异性PPARγ敲除明显减弱EPO改善小鼠糖代谢和激活肝脏PI3K/AKT的作用。同时,我们观察到EPO不仅可促进沉默信息调节因子1（SIRT1）表达,还可通过活化腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）增加NAD+/NADH比值激活SIRT1。而抑制SIRT1表达可减弱EPO增加PPARy表达和蛋白去乙酰化水平以及AKT磷酸化的作用。结论:我们的实验首次表明,EPO可通过PPARy介导的PI3K/AKT通路而改善肝脏胰岛素抵抗,同时EPO对SIRT1/PPARγ/PI3K/AKT通路的作用将为EPO改善胰岛素抵抗和治疗2型糖尿病奠定理论基础。第三部分 EPO改善肝脏脂代谢机制的研究目的:近年研究表明促红细胞生成素（EPO）明显降低肥胖和2型糖尿病小鼠的体重和体脂含量,但EPO对肝脏组织脂代谢的影响尚未见研究。本实验研究目的是探讨EPO对肝脏脂肪酸合成和脂肪酸氧化分解水平的影响。方法和结果:我们研究发现,在高脂处理的HepG2中,油红O染色显示EPO处理可明显较少高脂诱导的脂质沉积。另外,EPO可抑制胆固醇调节元件结合蛋白-1c（SREBP1c）的基因和蛋白表达以及其下游靶基因乙酰辅酶A羧化酶（ACC）的表达,但对脂肪酸氧化的关键因子过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPARα）及其下游靶基因肉毒碱棕榈酰基转移酶1A（CPT1A）的表达均无影响。结论:本研究表明EPO抑制HepG2细胞脂质沉积是通过抑制肝脏脂质合成而非促进脂质分解实现的。我们的研究首次发现EPO对肝脏脂质代谢同样有着明显的改善作用。