目的为研究精氨酸激酶(arginine kinase,AK)在抗捻转血矛线虫感染中的作用奠定基础。方法根据捻转血矛线虫精氨酸激酶基因序列设计1对特异性引物进行RT-PCR;将得到的片段克隆到pMD19-T载体后进行序列测定和分析;将该基因的开放阅读框克隆到pET-32a㈩载体中,获得原核表达质粒pET32/AK并转化大肠杆菌BL21;重组子用IPTG诱导后SDS-PAGE分析其表达情况;对重组蛋白变性、纯化后,用梯度尿素对其进行连续透析复性,对复性后的重组蛋白用定磷法进行精氨酸激酶活性分析。结果从捻转血矛线虫总RNA中扩增出大小约为1 104 bp的DNA片段。该基因与GenBank中捻转血矛线虫AK基因的相似性为98%。SDS-PAGE电泳结果表明该基因获得了表达,重组融合蛋白分子量大小约为60.3×10~3,主要以包涵体形式存在。Western blot分析显示该重组蛋白可被人工感染捻转血矛线虫山羊的血清所识别。重组蛋白具有一定的酶活性,其最佳反应温度和pH值分别为30℃和pH 7.5。结论该重组蛋白具有一定的抗原性和激酶活性,为深入研究精氨酸激酶在抗捻转血矛线虫感染中的作用奠定了基础。