梨果实中绝大部分的糖都在液泡中积累。在果实贮藏过程中,伴随着液泡酸性转化酶活性的变化,糖组分及含量也发生变化。本研究结合代谢物分析、酶活性测定、转录组分析、qRT-PCR验证、生物信息分析、亚细胞定位分析、瞬时过表达验证基因功能等生理生化/分子生物学实验结果,鉴定出‘丰水’梨贮藏过程中参与糖代谢的液泡酸性转化酶PbrAc-Inv1及其抑制剂(PbrII5)。PbrAc-Inv1定位于液泡膜上,参与蔗糖的水解过程,改变果实中糖分组成和口感。PbrII5也位于液泡中,可以与PbrAc-Inv1结合形成非活性复合体,抑制液泡酸性转化酶活性,从而减少蔗糖水解。然而,PbrII5和细胞壁酸性转化酶(PbrAc-Inv3)之间没有互作。结合序列比对结果,将PbrAc-Inv1和PbrAc-Inv3中对应结构域进行置换,而后利用生物膜衍射(BLI)技术分析突变体和PbrII5之间亲和力。研究结果表明,位于PbrAc-Inv1催化位点(’WEC-P/V-D’box)左侧的结构域(‘ITIGSKINTTGISMVYTTTDFVNYELYDGVLHEVPG’)在其与PbrII5的相互作用中发挥了关键作用。