【摘 要】
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应用RT-PCR技术从培养的感染FCV病毒的F81细胞中提取病毒总RNA,克隆3端保守区,再用特异PCR扩增目的基因,将其亚克隆到pET-28a载体,筛选并构建pET-FCV表达载体,并经酶切、PCR、测序鉴定正确后阳性重组表达质粒转化E.Coli BL-21(DE3)菌,经IPTG诱导后,表达产物用SDS-PAGE及Western-blot检测,结果显示表达产物以包含体的形式存在,可与FCV阳性
【机 构】
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广东省农科院兽医研究所,广州,510640;吉林大学兽医学院,长春,130062 广东省农科院兽医
【出 处】
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中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2006年学术年会
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应用RT-PCR技术从培养的感染FCV病毒的F81细胞中提取病毒总RNA,克隆3端保守区,再用特异PCR扩增目的基因,将其亚克隆到pET-28a载体,筛选并构建pET-FCV表达载体,并经酶切、PCR、测序鉴定正确后阳性重组表达质粒转化E.Coli BL-21(DE3)菌,经IPTG诱导后,表达产物用SDS-PAGE及Western-blot检测,结果显示表达产物以包含体的形式存在,可与FCV阳性血清特异性反应,表明表达产物具有良好的反应原性.
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