【摘 要】
：
背景 结核病(Tuberculosis,TB)仍是影响全球特别是发展中国家公共卫生的重大传染疾病,寻找更为灵敏的特征性的生物标志物是早期诊断肺结核的当务之急.蛋白组学技术的发展为从整体水平分析血清蛋白质提供了技术平台,表面加强激光解析电离飞行时间质谱(surface-enhanced laser desorption ionization time of flight mass spectrome
【机 构】
：
浙江大学细胞生物学研究所 绍兴市第六人民医院呼吸科
【出 处】
：
中华医学会结核病分会2013年学术大会
论文部分内容阅读
背景 结核病(Tuberculosis,TB)仍是影响全球特别是发展中国家公共卫生的重大传染疾病,寻找更为灵敏的特征性的生物标志物是早期诊断肺结核的当务之急.蛋白组学技术的发展为从整体水平分析血清蛋白质提供了技术平台,表面加强激光解析电离飞行时间质谱(surface-enhanced laser desorption ionization time of flight mass spectrometry, SELDI-TOF-MS)结合基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)、线性液质联用离子解串联质谱技术(linear ion chromatograph mass spectrometry/mass spectrometry, LC-MS/MS)技术,作为全新的蛋白组学技术可实现对血清中特异性标志物的筛选和鉴定.方法采用弱阳离子(weak cation exchange,WCC)磁珠结合SELDI-TOF MS技术建立180例初治继发性肺结核患者和211例对照的血清蛋白指纹图谱,应用Biomarker Pattern Software (BPS)软件建立肺结核的诊断模型.通过反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离及纯化潜在的生物标志物蛋白,应用MALDI-TOF MS跟踪目标蛋白,进一步用LC-MS/MS进行分析,以鉴定潜在诊断标志物蛋白,并用ELISA进行验证.结果 120例肺结核和120例非肺结核(60例健康对照、20例肺癌、20例肺炎、20例慢性阻塞性肺病(COPD) 血清蛋白图谱比较,35个蛋白峰在肺结核和非肺结核组之间有显著差异(P＜0.01,Fold≥1.5).筛选2554.6,4824.4,5325.7和8606.8rn/z四个蛋白峰构建了诊断模型,灵敏度为83.3％,特异度为84.2％,盲法检验灵敏度为75.0％,特异度为83.5％.在肺结核中相对高表达的2554.6m/z蛋白峰经RP-HPLC分离纯化,并利用MALDl-TOF MS及LC-MS/MS进行鉴定,为纤维蛋白原(fibrinogen,alpha polypeptide isoform alpha-E preproprotein)的一个片段.血清ELISA实验结果证实肺结核组的纤维蛋白原降解产物(fibrinogen degradation product,FDP)量均值高于健康对照组(5,005±1,297 vs.4,010±1,181 ng/mL,P＜0.05),142例临床随机收集的肺结核病人血浆中的纤维蛋白原含量(5.45±1.65 g/L)要高于正常值范围(2.0-4.0 g/L).结论 筛选肺结核相关的差异蛋白峰并构建了肺结核早期诊断的蛋白诊断模型,为建立肺结核病临床早期快速特异诊断的血清蛋白质组学标准,提高肺结核病的防治水平奠定基础；鉴定和验证了纤维蛋白原可能为肺结核早期诊断的潜在生物标志物之一,为临床肺结核早期诊断奠定了基础.
其他文献
目的 探讨机械通气下支气管动脉栓塞术治疗大咯血的临床疗效及应用价值。方法 回顾性分析了我院7例机械通气下经支气管动脉栓塞治疗的大咯血患者的临床资料与血管造影影像。结果 本组7例患者经造影证实多为支气管动脉或合并肋间动脉、胸廓内外动脉异常改变,7例均立刻止血。结论 机械通气下介入治疗合并窒息大咯血患者,是一种安全、有效和快速的治疗手段,扩大了介入治疗的适应症,为挽救患者生命带来了新的希望。
目的 分析结核科护理工作存在的安全隐患，并对解决措施进行探讨。方法 结合结核科护理工作的实际情况。从多个方面对存在的安全隐患进行分析。结果 完成了结核科护理工作的安全隐患分析，并针对性的提出了解决办法。结论 医院应对本院结核科护理工作存在的安全隐患进行逐一分析解决，以便在保障护理人员和患者健康的同时，使护理工作的整体水平得到提升。
目的 探讨结核病区护士工作压力与心理健康的关系及对策.方法 选取我院六个结核病区护士共107人，采用问卷法进行调查.结果 工作环境差的分值最高，达(3.22±0.77)分，其次为工作量太大，达(3.17±0.80)分；研究组患者的焦虑特质问卷值51人高于正常成人常模，表明结核病区护士存在明显的特质焦虑；结核病区护士的大部分工作压力与焦虑特质问卷值各因子呈正相关.结论 应从多方面采取积极有效的措施来
目的 通过了解精神科护士的心理健康状况及压力来源和程度，对精神科护士在不同学历、不同职称的压力状况进行分析对比，以做出相应的对策.方法 采用结构式问卷随机抽取我院精神科护士100人作为样本，用中国护士压力调查表及自行设计的个人一般情况调查表进行调查.结果 100个样本工作压力总平均值为(79.08±21.1)，其中在学历方面中专学历压力平均值为(62.4±13.32)，大专为(68.16±14.8
目的 探讨人性化护理在肺结核患者治疗中应用效果，减轻肺结核患者悲观、焦虑、恐惧等消极心理，积极配合治疗，达到彻底治愈的目的。方法 对收治的肺结核患者给予心理护理、用药护理、健康教育，体会护理效果。结果 通过提供精心的护理服务，患者克服了自卑消极情绪，树立积极治疗信心，取得了良好的治疗效果。结论 将人性化护理服务运用于肺结核患者的整个治疗过程中，使患者感受到了人性关怀的温暖，从而减轻消极心理，主动配
目的 对住院结核病患者佩戴口罩的比率、口罩种类和来源进行调查评估,以探讨有效的管理方法.方法 自行设计问卷, 通过对北京等14个省市20家医院的结核病房护士长或医院护理部主任进行调查来了解.结果 调查范围共涵盖32个病区,其中15个(46.9％)病区患者不佩戴口罩,16个(50.0％)病区部分患者佩戴口罩, 1个(3.1％)病区所有患者均佩戴口罩； 84.4％的病区患者佩戴普通一次性口罩和纱布口罩
Background Early diagnosis of smear-negative tuberculosis (TB) remains a great challenge for TB control and treatment.Real-Time Simultaneous amplication and testing method of Mycobacterium tuberculosi
目的 探讨RNA恒温扩增实时检测法(SAT)在肺结核临床诊断中的应用价值.方法 对2012年12月至2013年1月沈阳市胸科医院48例肺部疾病患者痰标本采用金胺O痰涂片法将其分为阳性组19例,阴性对照组29例,应用SAT法,BD960快速培养法,TB抗体检测法同时对上述痰标本进行检测.结果 采用,检验比较灵敏度和特异度等指标,结果显示单一法SAT法的灵敏度最高,为68.40％；特异度最高的为BD9
目的 建立RNA恒温扩增联合熔解曲线分析技术(RIARD-MCA)鉴定胞内分枝杆菌的方法,评估RIARD-MCA快速鉴定分枝杆菌临床分离株中胞内分枝杆菌的灵敏度和特异度.方法 以胞内分枝杆菌的16S rRNA的特异序列为检测靶标设计RNA探针和带有T7启动子的逆转录扩增引物,42℃恒温扩增实时检测及熔解曲线分析,鉴定胞内分枝杆菌.将胞内分枝杆菌倍比稀释分析RIARD-MCA鉴定胞内分枝杆菌的灵敏度
目的 筛选结核分枝杆菌特异性血清标记物,并进行体外表达及纯化。方法 通过Western blot技术筛选具有免疫原性的结核分枝杆菌特异蛋白质,质谱鉴定获得相应基因信息,设计扩增目的基因引物,PCR扩增目标基因,构建pTrcHis2-TOPO-KatG重组质粒；IPTG诱导体外表达特异蛋白质；树脂吸附纯化表达的蛋白。结果 质谱鉴定共获80个具有免疫原性的结核分枝杆菌特异蛋白候选物,其中42个蛋白质功