猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白NSP2原核表达与单克隆抗体的研制

来源 :中国畜牧兽医学会动物传染病学分会教学专业委员会第六届第12次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhou1022
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将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)S1株NSP2蛋白基因进行截短修饰(tNSP2),克隆于pGEX-6P-1载体,再转化大肠杆菌,并用IPTG诱导表达。Western-blot结果表明,融合表达的GST-tNSP2蛋白能被PRRSV阳性血清特异性识别,大小约50kD。经GST柱提取纯化蛋白GST-tNSP2,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,获得2株能稳定分泌抗NSP2蛋白抗体的杂交瘤细胞株,将其命名为2B5、3H3。亚型鉴定结果均为IgG 1型,其轻链均为Κ链。IFA结果证明,2B5和3H3均能与PRRSV S1毒株产生特异性反应,而不能与SY0608毒株反应。从而为PRRSV分离株的鉴定及NSP2功能研究奠定了重要基础。
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