猪伪狂犬病血清抗体gE-ELISA检测方法的建立

来源 :2007年中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:rockegg2009
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
以纯化的猪伪狂犬病病毒gE蛋白为抗原建立了检测猪伪狂犬病血清抗体的间接gE-ELISA方法。最佳反应条件为,抗原包被浓度为1.7μg/mL,待检测血清1:40稀释。与伪狂犬病阳性血清反应为阳性,与猪瘟阳性血清、猪细小病毒病阳性血清、猪繁殖与呼吸综合征阳性血清、猪乙型脑炎阳性血清、猪布氏杆菌病阳性血清、用猪伪狂犬病gE缺失疫苗免疫的猪血清及SPF猪阴性血清均无交叉反应。批间、批内试验变异系数分别不超过5%和9%。用该方法与Ingezim ELISA试剂盒对172份血清进行了平行检测,总符合率可达93.6%。试验结果表明:猪伪狂犬病血清抗体间接gE-ELISA检测方法具有较高的敏感性和特异性,且重复性好,可用于猪伪狂犬病血清抗体的检测,并能与猪伪狂犬病gE缺失疫苗的免疫抗体进行区分。
其他文献
目的:摸索出最佳分离纯化和复性重组禽流感病毒NSI抗原的方法,得到高纯度的重组蛋白。方法:将重组质粒pET32a-NS1转染大肠杆菌BL21(DE3)中表达,表达产物分别以尿素变性、复性,Ni-NTA His.Bind Resin亲和以及脱氧胆酸钠-N-十二烷基肌氨酸钠(DOC-SKL)洗涤溶解等3种纯化方法分别从包涵体中分离纯化NS1蛋白,并进行比较研究。结果:通过原核表达得到分子量约45ku的
HSN1禽流感的频繁发生及对哺乳动物和人类的跨种间感染,已经对人类健康安全构成了极大的威胁。但目前H5N1禽流感病毒(AIV)的致病机理仍不是十分清楚。近几年的研究表明:H5N1 AIV的致病作用与细胞因子“风暴”有关,病毒感染诱导机体免疫系统紊乱,导致细胞因子作用失衡可能是H5N1 AIV病死率高的一个重要因素。巨噬细胞移动抑制因子MIF能抑制巨噬细胞游走,促进巨噬细胞在炎症局部浸润、增生、激活
本研究采用间接免疫荧光的方法,用28株抗瘟病毒单克隆抗体对我国22株不同年份的猪瘟病毒流行毒株进行抗原性分析。结果表明:不同的毒株与单抗谱的反应存在明显差异。单抗谱与毒株之间的反应根据荧光的强弱可分为三类;28株单抗的识别谱有所差异,其中单抗302,303可以识别所有的毒株,抗猪瘟病毒E2蛋白的单抗识别的毒株数多于抗猪瘟病毒Erns蛋白的单抗,所有的毒株与抗瘟病毒属其它成员的单抗无交叉反应。不同基
根据逆转录病毒表达载体pBABA-puro的特点及多克隆酶切位点要求设计引物,以A型FMDV XJ-99的Pl2X基因和GFP基因的阳性克隆质粒为模板,用PCR方法扩增各基因片段。酶切后分步定向亚克隆至逆转录病毒表达载体pBABE-puro上。经PCR、酶切及测序鉴定表明,获得了含CFP的A型FMDV衣壳蛋基因的重组逆转录病毒表达载体,对今后用逆转录病毒载体包装系统进行FMDV的目的基因转移和表达
猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌(APP)引起的一种高度接触性、高致死率的呼吸道传染病。APP是一种多毒力因子病原,现已发现与APP的致病性有关的毒力因子包括荚膜多糖、脂多糖、外膜蛋白、转铁结合蛋白、溶血外毒素等,其中溶血外毒素是APP引起猪致病最主要的毒力因子,也是主要的保护性抗原。在此,从毒素分子结构,致病机理,免疫原性几个方面对其进行综述,以期获得以Apx为抗原制备减毒活疫苗的理论基础。
IBV是长期以来困扰养禽业的主要疾病之一。因其血清型众多,而不同血清型毒株间的交叉保护力很低,所以疫苗保护率不高。本文对IBV的病原学、遗传变异的原因及IBV分型进展概况进行了综述。
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是猪的主要病毒性传染病,免疫预防是控制该病的主要手段。本文综述了猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗、弱毒疫苗、基因工程疫苗的研究进展。
为探讨siRNA在BHK-21细胞中对猪脑心肌炎病毒(EMCV)的作用,以EMCV BJC3分离株各基因为靶点,设计并合成了8对siRNA,通过脂质体法转染BHK-21细胞,转染后4小时感染500 TCID50 EMCV BJC3,通过感染后不同时间段进行CPE观察、TCID50测定、real-time PCR、间接免疫荧光试验和Western-blot检测评价其对EMCV增殖的抑制作用。结果表明
在浙江地区进行鸭病病因的调查过程中,从患病鸭群中分离到一株引起鸭产蛋锐减而不死亡的病毒,经鉴定该病毒属于禽副粘病毒Ⅰ型,命名为YH99V株。以YH99V株的基因组RNA为模板,通过RT-PCR一步法扩增出其HN基因的cDNA片段,然后将其克隆至pMD18-T载体中,对其进行序列测定。测序后拼接出HN基因的序列长度为1785bp,该基因的ORF总长为1734bp,编码577个氨基酸。将YH99V株H
根据GenBank中公开的鸡新城疫病毒(NDV)基因序列合成了一对引物,通过RT-PCR扩增出了鹅源Ⅰ型禽副粘病毒(AMPV-1)或NDV JG97株的F基因。将扩增产物克隆到pGEM-T载体中,并进行序列测定。序列分析结果表明所扩增的基因片段含一个完整的、长1 662 bp的F基因开放阅读框(ORF)。该ORF编码长553个氨基酸的F蛋白,其中含12个半胱氨酸残基和6个潜在的糖基化位点。F蛋白裂