细胞外腺苷三磷酸(eATP)测定方法的建立

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目的建立一种简单易行的可用于测定细胞外腺苷三磷酸的化学方法。方法以葡萄糖为底物,己糖激酶为催化物,催化生成 6-磷酸葡萄糖,后者和氧化型辅酶Ⅱ作用生成还原型辅酶Ⅱ,在 340nm处有吸光度的变化,并且与ATP的含量成正比。通过重复性试验、回收试验、干扰试验、线性范围测定来确定方法的可靠性。结果重复性试验显示,eATP为45.51μmol/L时,CV为5A2%;eATP在 5.2μmol/L时,CV为7.56%;回收试验显示回收率为92.2%;线性分析为0-300μmol/L,灵敏度为0.25μmol/L;干扰试验显示,甘油三酯、溶血对测定存在负干扰,维生素C、肌酐、尿酸有负干扰。结论酶偶联法可作为eATP的常规测定方法进行自动分析测定。
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