共表达甲型流感病毒双基因的重组杆状病毒的构建及鉴定

来源 :四川省畜牧兽医学会2014学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ejian
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甲流可造成大规模流行的人畜共患急性呼吸道传染病,是长期以来威胁人畜健康的重要传染病之一,影响了社会稳定和造成严重的经济损失.目前接种疫苗是防控流感最有效的措施,使用的流感疫苗主要是甲型流感病毒的H1N1亚型和H3N2亚型以及乙型流感病毒的三联灭活疫苗,且主要针对流感病毒的HA和NA.当前流感疫苗应对流感大爆发时有一定的局限性.因此,研制更为安全、高效的新型疫苗迫在眉睫,VLPs疫苗是比较有发展前景的疫苗策略之一.IFA检测结果显示:rBac-M1-M2、rBac-M1-NA及rBac-M1-HA感染的Sf9昆虫细胞,在与特定抗体反应时,均检测到明显的黄绿色荧光,而无外源基因插人的rBac-NC感染的细胞中未检测到荧光;Western-blot检测结果显示:rBac-M1-M2、rBac-M1-NA及rBac-M1-HA感染的Sf9昆虫细胞上清中未能检测到特异性印迹,细胞沉淀样品在与特定抗体反应时,均检测到特异性印迹,rBac-NC感染的细胞中亦未检测到特异性印迹。以上结果表明:双基因重组杆状病毒rBac-M1-M2、rBac-M1-NA及rBac-M1-HA中的外源基因在Sf9昆虫细胞中成功表达。综上所述,本研究利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,成功构建了共表达甲型流感病毒双基因的重组杆状病毒rBac-M1-M2 , rBac-M1-NA及rBac-M1-HA,为研究流感病毒VLP的形成机制以及研发新型流感疫苗提供了一些思路。
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