【摘 要】
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采用RT-PCR技术特异地扩增了4株H5N1亚型高致病性禽流感病毒的NS基因,将获得的PCR产物分别与T载体进行连接,获得了4个毒株NS基因阳性克隆.阳性克隆序列分析结果显示分离毒株间核苷酸同源率在90.2~98.7﹪之间,氨基酸同源率在82.6~97.8﹪之间.与其它毒株比较A/Chicken/Heilongjiang/P46/2003和A/Chicken/Heilongjiang/G2/200
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(哈尔滨) 沈阳农业大学(沈阳)
【出 处】
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中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会
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采用RT-PCR技术特异地扩增了4株H5N1亚型高致病性禽流感病毒的NS基因,将获得的PCR产物分别与T载体进行连接,获得了4个毒株NS基因阳性克隆.阳性克隆序列分析结果显示分离毒株间核苷酸同源率在90.2~98.7﹪之间,氨基酸同源率在82.6~97.8﹪之间.与其它毒株比较A/Chicken/Heilongjiang/P46/2003和A/Chicken/Heilongjiang/G2/2003 NS基因序列的264~278处发生了15个核苷酸缺失;A/Goose/Jilin/W2/2004(H5N1)的NS1基因蛋白编码区的第652位碱基T/C突变而成为终止密码子,造成NS1蛋白的N-末端有13个氨基酸缺失.H5亚型禽流感病毒首次发生这种基因突变现象.研究发现不同基因型的H5N1亚型禽流感病毒在我国家禽中同时存在;再次证实了H9与H5亚型流感病毒基因间存在着广泛的遗传交换.因此,在严密控制H5N1高致病性禽流感流行的同时也要预防H9亚型禽流感,防止产生新的H5重组病毒株.
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2002年徐镔蕊通过对自然发生骨髓细胞瘤病的蛋鸡经过病理组织学、免疫组化及PCR检测,首次发现蛋鸡J亚群禽白血病(ALV-J).本实验采用临床发病的蛋用型鸡的病料,过滤除菌后接种于用11日龄的SPF鸡胚制备的鸡胚成纤维细胞(CEF).用ALV-Jgp85特异性单抗进行间接荧光抗体法(IFA)检测接种的CEF,结果呈阳性.提取接种病料的CEF的总RNA作反转录聚合酶链式反应(RT-PCR),在pol
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从圭亚那进口的金刚鹦鹉泄殖腔拭子中分离到一株新城疫病毒(ZPS),该毒株鸡胚平均致死时间(MDT)为55.2h,脑内致病指数(ICPI)为2.0静脉致病指数(IVPI)为2.57,表明该毒株属强毒株.根据从GenBank上查到的NDV融合蛋白(F)基因的序列,设计特异性引物,克隆了F基因5端部分核酸序列,由此推导了F蛋白的氨基酸序列,并对该毒株的基因型分类地位进行了初步分析.所测的核苷酸序列大小为
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用威兰VD-28、英特威CVI988、梅里亚CVI988、南京中牧公司CVI988和北京兽医生物药品厂814等五种MD疫苗分别经皮下注射免疫1日龄SPF鸡,并选用梅里亚CVI988疫苗进行胚胎免疫和二次免疫试验.所有试验鸡于免疫后21日龄用10稀释的京-1株强毒进行攻击,测得五种疫苗保护率分别为18/20、20/20、19/20、20/20和19/20.各疫苗一次免疫组间保护率虽有差异但都不显著(
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