Y-维生素E对哮喘小鼠气道及肺组织中IL-4、IL-13的影响

来源 :中华医学会第十八次全国儿科学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lv_dan1102
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目的:分析维生素E与哮喘发病的关系;观察哮喘小鼠喘息发作缓解情况;通过测量气道炎症因子IL-4、IL-13的量来评价y-VE的作用.方法:雄性Balb/c小鼠40只随机平均分成4组(n=10),分别为哮喘组(Asthma)、γ-维生素E(y-VE)干预组(VE)、地塞米松对照组(Dex)和生理盐水对照组(control).随机选取哮喘组、V-维生素E组、地塞米松对照组小鼠腹腔注射致敏液0.5mL进行致敏;再将小鼠置于密闭箱内30min,每日给予雾化吸入25g/L的OVA溶液进行激发,共激发1周.对照组用等量生理盐水代替致敏液或OVA进行腹腔注射和雾化吸入.末次激发24h后标本取材,留取血清液、支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺组织.取支气管肺泡灌洗液(BALF)Gimsa染色,显微镜下进行细胞计数细胞总数、嗜酸粒细胞、中性粒细胞、巨噬细胞及淋巴细胞.应用ELISA试剂盒检测BALF和血清中IL-13和IL-4含量.肺组织用石蜡包埋后进行HE染色,显微镜下观察肺组织中炎性细胞.免疫组织化学(IHC)检测IL-4和IL-13在肺组织中的表达部位.结果:一、各组小鼠激发后哮喘发作情况哮喘大多在激发后30分钟内发作,哮喘组经OVA激发后小鼠出现精神烦躁、口周发绀、点头呼吸和呼吸困难等表现;γ-VE干预组发作程度有所减轻;地塞米松组发作程度明显减轻;对照组未见异常.二、小鼠肺泡灌洗液细胞总数及细胞分类显微镜下各组小鼠BALF进行细胞计数,哮喘组小鼠BALF中细胞总数、嗜酸粒细胞、中性粒细胞、巨噬细胞及淋巴细胞数量与对照组相比均明显增加,有统计学意义(P<0.05);地塞米松组、y-VE组细胞总数、嗜酸粒细胞、中性粒细胞及淋巴细胞数量与对照组相比有统计学意义(P<0.05),但巨噬细胞计数与对照组相比无统计学意义(P>0.05);地塞米松组、y-VE组细胞总数、嗜酸粒细胞、中性粒细胞、巨噬细胞及淋巴细胞数量与哮喘组相比,有统计学意义(P<0.05).三、细胞因子检测y-VE干预组小鼠血清及肺组织中IL-4、IL-13表达含量分别与正常组和哮喘组相比均有统计学意义(P<0.05).四、血清中IgE水平y-VE干预组血清中IgE含量与哮喘组相比有统计学意义(P<0.05);y-VE干预组血清中IgE含量与对照组相比无统计学意义(P>0.05).五、小鼠肺组织病理HE染色哮喘组小鼠气道壁及气道平滑肌明显增厚,支气管周围可见大量炎细胞浸润,主要以嗜酸细胞、淋巴细胞为主;y-VE干预组小鼠气道壁及气道平滑肌中度增厚,支气管周围可见中量炎细胞浸润;地塞米松组小鼠气道壁及气道平滑肌轻度增厚,支气管周围可见少量炎细胞浸润.六、IL-4/IL-13免疫组织化学染色免疫组织化学染色提示y-VE组中IL-4和IL-13表达于肺间质中.结论:1、Balb/c小鼠哮喘模型制作良好;2、通过口服y-VE干预哮喘小鼠,可使哮喘小鼠血清及肺组织中的IL-4和IL-13表达含量下降,从而减轻哮喘气道炎性介质的表达,参与哮喘的发病机制;3、y-VE对支气管哮喘的治疗有一定的应用前景.
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