【摘 要】
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目的：观察蒺藜皂苷对大鼠皮层神经元经缺氧/复氧后细胞凋亡的影响，并探讨其可能的作用机制。方法：离体培养大鼠皮层神经元，先用95％N2与5％CO2混合气体造成细胞缺氧3小时，再给予95％O2与5％CO2混和气复氧12小时，建立缺氧/复氧损伤的皮层神经元凋亡模型.中药组于缺氧和复氧时均加入蒺藜皂苷进行干预。比色法测定皮质神经元乳酸脱氢酶(LDH)释放漏出率;Annexin V-FITC/PI双染，流式
【机 构】
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北京中医药大学东方医院,北京 100078 首都医科大学附属北京佑安医院,北京 100069
【出 处】
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国家中医药管理局脑病重点研究室建设研讨会暨中风病科研成果推广交流会
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目的：观察蒺藜皂苷对大鼠皮层神经元经缺氧/复氧后细胞凋亡的影响，并探讨其可能的作用机制。
方法：离体培养大鼠皮层神经元，先用95％N2与5％CO2混合气体造成细胞缺氧3小时，再给予95％O2与5％CO2混和气复氧12小时，建立缺氧/复氧损伤的皮层神经元凋亡模型.中药组于缺氧和复氧时均加入蒺藜皂苷进行干预。比色法测定皮质神经元乳酸脱氢酶(LDH)释放漏出率;Annexin V-FITC/PI双染，流式细胞仪定量分析细胞凋亡百分率;Fluo-3和JC-1荧光染色，激光扫描共聚焦显微镜分别观察细胞内钙和线粒体膜电位的变化，荧光酶标仪测定神经元胞浆内Caspase3/7的活性，并采用免疫细胞化学法观察细胞Bax蛋白表达情况.
结果：细胞经缺氧3h复氧12h后，凋亡率明显增加，细胞内钙增加，线粒体膜电位显著降低，胞浆内Caspase3/7活性增多，Bax蛋白大量表达(P<0.01).蒺藜皂苷能降低细胞内钙浓度，抑制缺氧-复氧损伤的皮层神经元线粒体膜电位的降低，减少Caspase3/7的活性，并可降低Bax蛋白的表达，从而抑制细胞凋亡的发生(P<0.01)。
结论：缺氧/复氧可以诱导皮层神经元的凋亡。蒺藜皂苷可降低缺氧/复氧诱导细胞凋亡的发生，其机制与降低细胞内钙维持线粒体膜电位的稳定，抑制Caspase酶活性，降低Bax蛋白表达有关。
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