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柞蚕核型多角体病毒(ApMNPV)通常只感染柞蚕、樗蚕等少数昆虫及所属细胞,具有较高的宿主专一性.我们曾发现ApNPVΔph/egfp+在感染不同昆虫细胞后,绿色荧光蛋白有不同程度表达.为进一步了解ApNPVΔph/egfp+在不同昆虫细胞中感染增殖情况, 我们采用荧光定量实时PCR(Quantitative real-time Polymerase chain reaction,qRT-PCR) 方法对ApNPVΔph/egfp+在昆虫细胞BmN、Tn-Hi5 及Sf21 中的增殖进行了分析.方法：(1)以PMD18-T/egfp 质粒DNA 为模板进行qRT-PCR 检测,以CT 值为纵坐标,拷贝数为横坐标建立标准曲线,以此为标准定量分析感染细胞中病毒拷贝数.(2)ApNPVΔph/egfp+(MOI 5)分别感染BmN、Tn-Hi5 和Sf21 昆虫细胞,在病毒感染后的第8、16、24、48、72、96 和120 小时分别收集细胞,提取基因组DNA,进行qRT-PCR.(3)为分析病毒感染细胞产生子代病毒对细胞的持续感染能力,分别收集上一代感染病毒120h 的细胞培养液直接用于下一代感染相应的昆虫细胞,收集不同感染代数的昆虫细胞,提取细胞基因组DNA 用于qRT-PCR.PCR 结果参照标准曲线定量并绘制病毒增殖曲线.结果：ApNPV-Δph/egfp+在感染Tn-Hi5 细胞24 小时后,病毒增殖较快,感染72 小时后,病毒增殖进入平稳期,病毒增殖速率降低,感染120h 后细胞中病毒的拷贝数是感染8 小时病毒拷贝数的100 倍.而ApNPVΔph/egfp+在BmN 和Sf21 细胞中增殖缓慢.虽然ApNPV-Δph/egfp+可感染Tn-Hi5 细胞,但随病毒感染代数增加,细胞中病毒的拷贝数呈下降趋势,与第1 代感染的细胞中的病毒拷贝数相比,第5 代感染细胞中的病毒拷贝数下降了约50％.而分别感染ApNPVΔph/egfp+的BmN 和Sf21 细胞的培养液几乎不能再次感染相应的细胞.qRT-PCR 分析结果表明ApMNPV 能够感染Tn-Hi5 细胞,但在Tn-Hi5 细胞中产生子代病毒的能力受到限制；而在BmN 和Sf21 细胞中复制增殖明显受到抑制,不能产生子代病毒对细胞产生继代感染.