【摘 要】
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为表达牛乳头瘤病毒2型(BPV2)衣壳蛋白L1基因。本研究采用PCR方法从奶牛皮肤肿瘤病料中扩增BPV2沙湾分离株L1基因,克隆入pMD18-T载体中,测序后进行序列分析。将BPV2沙湾株L1基因亚克隆入原核表达质粒pGEX4T-1中,用IPTG诱导L1蛋白表达,并对重组蛋白进行SDS-PAGE和Western blot分析。SDS-PAGE分析显示,诱导后能够表达分子量80ku的重组蛋白;Wes
【机 构】
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石河子大学动物科技学院,新疆石河子,832003 中国农业科学院兰州兽医研究所,甘肃兰州
【出 处】
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中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会
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为表达牛乳头瘤病毒2型(BPV2)衣壳蛋白L1基因。本研究采用PCR方法从奶牛皮肤肿瘤病料中扩增BPV2沙湾分离株L1基因,克隆入pMD18-T载体中,测序后进行序列分析。将BPV2沙湾株L1基因亚克隆入原核表达质粒pGEX4T-1中,用IPTG诱导L1蛋白表达,并对重组蛋白进行SDS-PAGE和Western blot分析。SDS-PAGE分析显示,诱导后能够表达分子量80ku的重组蛋白;Western blot显示该蛋白可与抗BPV2多克隆抗体发生免疫反应。小鼠免疫试验表明,BPV2 L1重组蛋白可诱导小鼠产生抗BPV2 L1特异性抗体;琼脂扩散试验显示,重组的L1蛋白具有良好的免疫原性。本研究通过原核表达的BPV2 L1蛋白,证实其具有良好的反应原性及免疫原性,为牛乳头瘤病的疫苗和诊断试剂研发奠定了基础。
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