【摘 要】
：
为表达牛乳头瘤病毒2型(BPV2)衣壳蛋白L1基因。本研究采用PCR方法从奶牛皮肤肿瘤病料中扩增BPV2沙湾分离株L1基因,克隆入pMD18-T载体中,测序后进行序列分析。将BPV2沙湾株L1基因亚克隆入原核表达质粒pGEX4T-1中,用IPTG诱导L1蛋白表达,并对重组蛋白进行SDS-PAGE和Western blot分析。SDS-PAGE分析显示,诱导后能够表达分子量80ku的重组蛋白;Wes
【机 构】
：
石河子大学动物科技学院,新疆石河子,832003 中国农业科学院兰州兽医研究所,甘肃兰州
【出 处】
：
中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会
论文部分内容阅读
为表达牛乳头瘤病毒2型(BPV2)衣壳蛋白L1基因。本研究采用PCR方法从奶牛皮肤肿瘤病料中扩增BPV2沙湾分离株L1基因,克隆入pMD18-T载体中,测序后进行序列分析。将BPV2沙湾株L1基因亚克隆入原核表达质粒pGEX4T-1中,用IPTG诱导L1蛋白表达,并对重组蛋白进行SDS-PAGE和Western blot分析。SDS-PAGE分析显示,诱导后能够表达分子量80ku的重组蛋白;Western blot显示该蛋白可与抗BPV2多克隆抗体发生免疫反应。小鼠免疫试验表明,BPV2 L1重组蛋白可诱导小鼠产生抗BPV2 L1特异性抗体;琼脂扩散试验显示,重组的L1蛋白具有良好的免疫原性。本研究通过原核表达的BPV2 L1蛋白,证实其具有良好的反应原性及免疫原性,为牛乳头瘤病的疫苗和诊断试剂研发奠定了基础。
其他文献
Dendrolimus kikuchii Matsumura nucleopolyhedrovirus (DkNPV) is a novel nucleopolyhedrovirus strain that has been exhibited high potential as biological control agent against D.kikuchii.In this work,a
杨树是非常重要的经济树种.杨树溃疡病是危害杨树枝干的主要病害之一,研究杨树溃疡病的致病机制有重大的经济和生态意义,蛋白质组学作为后基因组时代的新兴研究领域,是当今生物学研究中揭示物质生命现象的重要手段,是林木生物学的重要内容.对杨树溃疡病的典型病斑进行蛋白质组学分析,对阐明杨树溃疡病的致病机制以及杨树的抗病机制有重要意义；也为其他林木与病原菌互作的蛋白质组学研究提供了参考.本研究以野外采集的、9月
吡虫啉属新烟碱类杀虫剂,高效、广谱、具有卓越的内吸活性及很高的残留活性.前期研究表明树干注射吡虫啉对危害柳树的光肩星天牛、柳兰叶甲、柳蚜、华北大黑鳃金龟等多种害虫有较好的控制作用,田间持效期长达110 d左右.为验证吡虫啉树干注射后对害虫的田间防效,系统观察药剂对害虫的杀伤效果,分析树干注药后药剂在树体内的残留动态,探讨吡虫啉树干注射后对害虫的长效控制机理.本研究测定了吡虫啉对华北大黑鳃金龟成虫的
选取3000羽岭南黄父母代肉种鸡,随机平分为两组,即免疫F株鸡毒支原体(FMG)疫苗组,不免疫FMG疫苗对照组。通过体重、产蛋性能、蛋品质、种蛋受精率、孵化率以及气囊、生殖系统部位的变化和成熟卵泡数量的比较,评价在产蛋前接种FMG疫苗对肉种鸡生产性能的影响。结果显示,使用FMG疫苗,肉种鸡强毒MG的检出率逐渐降低,产蛋率提高3-5％,种蛋哈氏单位提高3.32,种蛋血肉斑率降低28％,饲料转化率(料
随着干扰素(Interferon)在养殖业尤其是家禽养殖业上的应用越来越广泛,干扰素在提高机体免疫力和增强免疫应答的作用受到人们的广泛关注。本实验选用在一个生产周期(约45天)的白羽肉鸡,通过对使用和未使用干扰素的两组商品肉鸡在鸡新城疫、禽流感H9抗体影响效果的比较,并进行抗体检测数据统计和方差分析,研究干扰素对商品肉鸡免疫效果的影响,以便更好为今后的养殖生产提供借鉴。
本实验从华东地区某羊场采集定点监测的绵羊血液样品,通过RT-PCR方法检测瘟病毒5-UTR基因,证实一只绵羊感染BDV.阳性血清样品接种MDBK细胞,盲传8代后观察,该毒株不致细胞病变。用BDV特异性Npro基因引物检测细胞培养物RNA,在第6-8代细胞培养物中获得预期大小片段,测序分析表明成功分离出一株BDV,将其命名为JSLS12-01.5-UTR和Npro基因系统进化分析显示,该分离株与BD
本研究应用MDBK细胞从长春某牛场发生疑似为牛病毒性腹泻-粘膜病的病牛粪样中分离到一株病毒,经过电镜观察和序列测定证实为牛病毒性腹泻病毒,并将其命名为牛病毒性腹泻病毒CC13B株(BVDV-CC13B).对BVDVCC13B株完整基因组序列进行了测定,结果显示CC13B毒株的全基因组为12281 bp.将BVDV-CC13B毒株的全长基因组序列与发表的BVDV病毒序列进行同源性比对,结果其核苷酸序
根据GenBank登录的BVDV-2 E2基因序列,设计特异性引物,对BVDV-2新疆SW分离株E2基因进行RT-PCR扩增,克隆入T载体中测序,然后亚克隆入酵母(P.Pastoris)分泌型表达载体pPIC9K中,构建重组表达载体pPIC9K-E2.用SalⅠ酶切线性化重组质粒pPIC9K-E2,电转化P.Pastoris GS115,通过G418筛选重组酵母菌GS115-pPIC9K-E2,用
为了解宁夏牛传染性支原体肺炎的感染情况,采用牛支原体间接ELISA试剂盒对发生4起牛支原体肺炎的疫区及其周边地区的牛进行了支原体肺炎抗体血清学调查。结果显示3月龄-1岁之间的牛发病明显,主要表现为肺炎和关节炎;调入牛经过长途运输后进入本地1周内发病,且发病数量急剧上升;调入隐性带菌牛与本地牛同群混合饲养后,3月龄-1岁之间的本地牛发病明显,有接触史的绵羊呈隐性感染。调查结果表明,在引进牛群时应该对
利用高通量测序技术构建牛病毒性腹泻病毒BVDV感染和未感染的MDBK细胞microRNAs的表达谱。利用生物信息学软件分析差异表达的microRNAs.Hoechst染色、流式细胞仪检测和caspase酶活性检测分析miR-1249的靶蛋白。WB、荧光素酶报告基因检测系统验证miR-1249的靶蛋白。结果显示,BVDV感染的细胞与正常细胞相比,差异表达的microRNA共28个,其中26个micr