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药用植物内生真菌具有产生多种生物活性物质的特性,已成为筛选新型、高效、广谱、抗菌活性物质的重要微生物来源,也是抗病性有机饲料添加剂的资源。本研究从分离的25株蒲公英内生真菌中筛选得到1株高产酚类活性物质、广谱抗病性内生真菌PG23,对其进行了较为系统的研究。对PG23采用形态学观察和ITS序列分析进行其分类学鉴定。鉴定PG23(GenBank登录号:JF723543)属于子囊菌门(Ascomycota)、腔菌纲(Leculoascomycetes)、座囊菌目(Dothideales)、座囊菌科(Dothideales)、茎点霉属(phoma sacc.)的真菌。PG23具有凝乳和利用硝酸盐的生理生化特性。以常见禽类强致病性金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为指示菌,对PG23产抗菌活性物质的发酵培养基进行优化。优化后的最佳的培养基的组成分别为:以马铃薯浸汁为基础,添加葡萄糖2.5%、大豆油0.59%、玉米粉O.15%、蒲公英汁8%,优化后对大肠杆菌的抑菌圈直径达到26.7mm与优化前相比提高了22.47%;以马铃薯浸汁为基础,添加葡萄糖2.65%、豆油0.53%、玉米粉O.10%、蒲公英汁为7.06%,优化后对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径达到40.Omm与优化前相比提高了77.8%。优化后的最佳发酵条件是:装液量为45 mL/250mL、初始pH为6.5、最适温度为26℃、菌种接种量为10%、摇床转速为160r/min,发酵液中抑菌活性物质的含量最高,抑菌圈直径达到32.6 mm。PG23的发酵液在30℃~100℃范围内具有良好的抗菌热稳定性;在pH 1~7对G-大肠杆菌有良好的抑菌效果,在pH 1~13对G+金黄色葡萄球菌具有良好的抑菌效果,同时,对嗜水气单胞菌、爱德华氏菌等鱼类病原菌也具有高的抑菌活性;PG23的发酵液还具有消除大肠杆菌β-内酰胺酶耐药质粒的作用;经化学成分鉴别初步证实发酵液主要含酚类、还原糖类和有机酸类等生物活性物质;对昆白鼠经口灌服5天的发酵液浓缩干物质,每天2次、每次0.2mL(相当于200mL发酵液/25g体重),观察9天进行急性毒性试验证实:没有急性致死性毒性,解剖各器官无明显异常、组织器官切片未发现明显组织病变。对PG23发酵液进行极性逐渐增强的连续萃取分离,经抑菌示踪试验表明:抑菌的活性物质主要分布在乙酸乙酯的萃取相、正丁醇的萃取相和萃余相中:采用薄层层析和硅胶柱层析对乙酸乙酯相的抑菌活性物质进行分离,得到强抑菌活性的洗脱液,经降温处理出现粗结晶;通过高效液相色谱、气质联用分析结晶产物的组成和化学结构,证实该结晶主要有间甲基苯酚、邻甲基水杨酸甲酯、2-氢,3-甲基,3-甲酸甲酯苯并噻吩等酚类化合物组成。这是首次报道蒲公英内生真菌产酚类活性物质。PG23具有良好的广谱抗菌性、消除耐药性、无毒性、热稳定性等多种特性,适宜作为抗病性有机饲料资源。