【摘 要】
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为筛选电融合液最佳钙离子浓度及电场强度,提高电融合后小鼠四倍体囊胚率和囊胚细胞数,本实验对2-细胞胚胎采用电融合法进行小鼠四倍体胚胎制作,研究了九种不同钙离子浓度(0.05,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0,1.2,1.4 mmol/L)的0.3M甘露醇电融合液对昆明小鼠2-细胞胚胎电融合效果的影响,并对钙离子浓度1.0 mmol/L条件下的电融合场强(500(-)3000 V/cm
【机 构】
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中国农业大学动物科技学院,北京,100094 英国诺丁汉大学,诺丁汉
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十三届学术研讨会
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为筛选电融合液最佳钙离子浓度及电场强度,提高电融合后小鼠四倍体囊胚率和囊胚细胞数,本实验对2-细胞胚胎采用电融合法进行小鼠四倍体胚胎制作,研究了九种不同钙离子浓度(0.05,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0,1.2,1.4 mmol/L)的0.3M甘露醇电融合液对昆明小鼠2-细胞胚胎电融合效果的影响,并对钙离子浓度1.0 mmol/L条件下的电融合场强(500(-)3000 V/cm)进行了筛选.实验结果表明,场强1000V/cm,脉冲时程30 μs,单电脉冲条件下,九种不同钙离子浓度电融合液融合率分别为:50.00±14.14％、66.67±5.77％、66.97±25.58％、62.48±16.39％、64.77±11.30％、67.38±15.32％,84.36±6.98％,77.78±18.43％,80.79±9.35％;钙离子浓度为1.0mmol/L的融合液融合率最高,与钙离子浓度为0.05 mmol/L的融合率差异极显著(P＜0.01),与而0.4,0.6,1.2,1.4 mmol/L的融合率差异显著(P＜0.05),囊胚率分别为25.00±7.07％、17.89±15.39％、28.79±16.37％、25.91±13.28％、23.68±8.63％、38.56±14.86％、70.70±13.94％、46.11±11.34％、44.92±23.01％,对照组为67.95％±19.34,钙离子浓度为1.0mmol/L融合液的囊胚率最高,与钙离子浓度为0.05,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.4 mmol/L组均差异极显著;与1.2mmol/L浓度组差异显著,但与对照组差异不显著.钙离子浓度为1.0 mmol/L,脉冲时程30μ s,单电脉冲条件下,电场强度为800V/cm融合率最高为86.67％,与500 V/cm相比差异极显著,与2000,2500,3000V/cm差异显著,电场强度为600,800,1000,1200,1400,1500V/cm时组间差异不显著;电场强度为1000V/cm时囊胚率最高为47.22％,但与800V/cm差异不显著.由此说明,融合液的钙离子浓度对胚胎融合及其后期发育的都有影响.
其他文献
[方法]利用屠宰场卵巢采集的卵母细胞,以台盼蓝染色、二乙酸荧光素(FDA)染色鉴定义母细胞冷冻后的存活率,以体外成熟和体外受精鉴定卵母细胞冷冻后的发育能力,研究了不同冷冻方法和不同冷冻保护剂对猪卵母细胞的冷冻效果.[结果](1)程序化法冷冻保存中,3种冷冻保护剂乙二醇(EG),二甲基亚砜(DMSO),甘油(Gly)均对猪MⅡ期卵母细胞有冷冻保护作用,极显著高于对照组(存活率33.8％,25.8％,
该试验使用分离的X-精子,通过超数排卵处理供体牛115头生产性别控制胚胎.试验得出在供体牛发情后10-12小时输X-精子2支,间隔10-12小时再输1支,平均获可用胚4.73±3.45枚;不同公牛X-精子的超排效果差异明显(P＜0.05).与此同时,还得出用非分离冻精的1/5支(约160万有效精子),获得较好的超排结果.移植X-精子生产的体内冷冻胚胎85枚,受胎率为57.65％.
本实验以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,比较研究了不同山羊个体精子对外源DNA的结合能力,外源DNA转染对精子活力和受精能力影响以及精子介导基因转移的可行性和效率.结果表明:不同个体的山羊精子对外源DNA结合能力存在显著差异(P＜0.01),其中1号供体携带外源DNA的比例为(43.8±2.97)％,几乎相当于2号供体的两倍(22.3±1.86)％;精子与外源DNA相互作用后,将导致活力和受精能
本文系统介绍了母羊一种新型的非手术子宫导入生殖细胞的技术,分析了该技术在人工授精和胚胎移植技术中的应用,旨在促进该技术在生产中的应用和完善.探讨了反刍动物子宫深部输精,对提高输卵管有效精子数和受精率的理论依据;从解剖学特点上研究了山羊和绵羊子宫颈管有皱褶和无皱褶两类结构及其隘口、"Y"状盲端等对器械导入子宫的影响;重点介绍了一种子宫导入工具在羊非手术操作中的导入机制,其关键是不断改变子宫颈轴向和加
本研究选择种公牛场正常采精公牛67头,研究口服阿维菌素驱虫后对精液生产指标和精子质量的影响.结果表明:驱虫前后,种公牛的采精量差异不显著,原精密度和冻精生产数差异极显著(p＜0.01),有效射精次数差异显著(p＜0.05),精液冻后的畸形率和顶体完整率差异极显著(p＜0.01).
本研究选取12头具有正常发情周期的16～17月龄青年牛,随机分为两组.试验组6头牛免疫重组猪抑制素α亚基融合蛋白1mg/头,首免后第28和第56天分别进行加强免疫,剂量为0.5mg/头.对照组6头牛同期注射5ml生理盐水.在首免当天、首免后第15天、第一次加强免疫后11天以及第二次加强免疫后第16天采血,以测定血液中抗抑制素抗体水平.结果显示试验组在免疫后血液中抗抑制素抗体水平明显上升,而对照组则
本试验对影响取样后的性别鉴定胚胎移植妊娠率的因素进行了分析.结果表明,性别鉴定胚胎的鲜胚和冻胚移植妊娠率均低于非性别鉴定胚胎,但二者差异不显著(P 0.05),这表明性别鉴定胚胎在生产中应用是可行的.随着胚胎细胞取样数的增多,其移植妊娠率逐渐下降,且冷冻带来的损伤明显增大;性别鉴定胚胎在体外放置时间小于5小时的妊娠率比大于5小时的高且差异极显著(P＜0.01);性别鉴定胚胎移植时受体的最佳移植时间
本文以雌性2-3岁关中奶山羊为试验动物,对其进行超数排卵,检测血清中E2、P4含量的变化及其与超排效果的关系.试验发现,试验组黄体数(17.5±8.38枚/头),获胚数(15.9±8.67枚/头)和可用胚数(12.1±5.51枚/头)极显著(P＜0.01)高于对照组(2.7±0.95枚/头,2.0±0.94枚/头,1.4±0.70枚/头).发情时E2峰值44.19±15.14 pg/mL极显著高于
本研究采用6种常温保存液对猪精液进行预处理,再用3种冷冻基础液进行冷冻保存,冷冻-解冻后以精子活率作为评定指标,研究常温保存液和冷冻基础液对猪精液冷冻保存的效果,以及他们之间的配伍效应.结果表明,不同的常温保存液对解冻后精子活率的影响存在显著差异(P＜0.05),而3种冷冻基础液对冻后精子活率的影响无明显差异(P＞0.05);不同的常温保存液与冷冻基础液之间存在明显的配伍效应(P＜0.01),并且
本试验主要研究在人工授精和胚胎移植过程中注射hCG以提高奶牛受胎率.试验一随机选取自然发情后的4～8岁荷斯坦经产奶牛39头,进行人工授精,在输精后第5天和第10天(输精当天为第0天),试验Ⅰ组(n=19)肌肉注射hCG 2000 IU/头,对照Ⅰ组(n=20)同期注射生理盐水5ml/头.输精后45天对未返情的牛直肠检查受孕情况.结果显示,在输精后用hCG处理可提高受胎率,但差异不显著(63.16％