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双孢蘑菇是次级同宗配合的食用菌，通过单孢分离获得不育同核体的概率非常低，为了解决这一难题，从美国引进双孢蘑菇四孢变种菌株，进行杂交育种技术的研究。结果表明：双孢蘑菇四孢变种的子实体95％担子着生4个担孢子，随机分离的单孢菌株与双孢蘑菇分离的不育同核体菌株间均能杂交。不同杂交菌株子实体担子上着生的担孢子类型存在明显的差异。杂交菌株分离的单孢菌株与四孢变种分离的单孢菌株间仍具有较高的杂交率，而与双孢蘑菇分离的不育同核体间的杂交率较低。大部分杂交菌株保持出菇快、扭结多、质地松、易开伞等野生菌株的特性，部分杂交菌株质量得到改善，表现出质地结实、不易开伞等优良性状。通过杂交育种可以筛选获得具有四孢特性的优良菌株，为双孢蘑菇杂交育种创建新的种质资源。