【摘 要】
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为探讨双孢蘑菇基质降解能力退化的基因表达差异与分子机制,对中国主栽双孢蘑菇As2796及其两个基质降解能力退化突变体2796-3、2796-5进行了mRNA差异显示(DDRT-PCR)和蛋
【机 构】
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福建省农业科学院食用菌研究所福州350014
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为探讨双孢蘑菇基质降解能力退化的基因表达差异与分子机制,对中国主栽双孢蘑菇As2796及其两个基质降解能力退化突变体2796-3、2796-5进行了mRNA差异显示(DDRT-PCR)和蛋白质双向电泳(2-DE)分析.DDRT-PCR发现有5个基因存在明显的差异表达,同源性搜索表明部分基因与基质降解酶类具有较高的同源性.根据双孢蘑菇基因组序列信息设计引物,扩增出了DDRT-PCR中5个差异基因带内含子的编码序列及其上游约1200bp调控序列并进行克隆与测序比较,结果表明这些基因与上游序列在三个菌株中并无可重复的差异.2-DE分析发现了2个明显的、可重复的差异蛋白质,在退化菌株中分别为上调和下调表达,且2个退化菌株表现一致.根据质谱(MALDI-TOF-MS)分析和数据库检索结果,2个差异蛋白质初步鉴定为肌动蛋白和NADH脱氢酶铁硫蛋白3.
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