猪乙型脑炎病毒E蛋白基因的分段克隆及原核表达

来源 :中国畜牧兽医学会2010学术年会暨第二届中国兽医临床大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:adayidaai
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应用PCR方法,分别扩增出流行性乙型脑炎病毒(JEV)E基因的JEN及JEC片段,经克隆鉴定后,与PET-28a表达载体连接,构建了重组表达质粒PET28a-JEN,PET-28a-JEC,经酶切和测序鉴定正确后,转化到大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE分析.结果显示,分别成功构建了重组表达质粒PET-28a-JEN,PET-28a-JEC,测序结果表明插入片度分别为933bp,480bp.含有PET-28a-JEN,PET-28a-JEC重组质粒的大肠杆菌BL21(DE3)经IPTG诱导后可分别获得高效表达,表达的蛋白分子质量分别约为40Ku和20Ku.该表达产物的稳定高效表达为乙脑的诊断试剂开发提供了依据.
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