朊蛋白受体基因敲除的打靶载体构建

来源 :中国畜牧兽医学会2010学术年会暨第二届中国兽医临床大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kefamz
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目的:传染性海绵状脑病是由朊病毒(PrPSc)感染人和动物引起的慢性致死性神经退型性病变.该病致病机理中,异常的朊蛋白是致病的主要因素,另外除了宿主正常朊蛋白作为一个必需条件之外,还必须有受体37kDa/67kDa LRP/LR的参与才能完成感染过程.本文旨在介绍牛朊蛋白受体基因敲除正负筛选型打靶载体的构建过程及技巧,为将来生产敲除朊蛋白受体基因的克隆牛提供依据. 方法:通过PCR扩增和酶切后连接的方法,最终构建敲除牛朊蛋白受体的正负筛选型打靶裁体, 结果:经过酶切验证和PCR产物测序结果分析,三个片段都准确插入到载体的相关位置, 结论:最终打靶载体SN-Ko-XY构建成功。
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