【摘 要】
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目的 观察香烟烟雾逐代持续染毒致正常人支气管上皮细胞(BEAS-2B)的恶性转化效应.方法 人支气管上皮细胞株(BEAS-2B)用无血清LHC-8培养基于细胞普通生长条件下培养.将对数生长期的BEAS-2B细胞以每孔1×105/ml的密度接种于transwell膜上,每孔1.5ml.待细胞贴壁后弃去旧培养基,将膜置于细胞气体染毒装置中,膜上方香烟烟雾持续泵入,使细胞与烟雾直接接触,控制转速维持烟雾
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目的 观察香烟烟雾逐代持续染毒致正常人支气管上皮细胞(BEAS-2B)的恶性转化效应.方法 人支气管上皮细胞株(BEAS-2B)用无血清LHC-8培养基于细胞普通生长条件下培养.将对数生长期的BEAS-2B细胞以每孔1×105/ml的密度接种于transwell膜上,每孔1.5ml.待细胞贴壁后弃去旧培养基,将膜置于细胞气体染毒装置中,膜上方香烟烟雾持续泵入,使细胞与烟雾直接接触,控制转速维持烟雾浓度稳定于20％.膜下方通人雾化的培养基提供营养及湿润环境.染毒第一代记为T1,每代染毒均进行两次,每次10 min,两次染毒间隔一天共历时三天,与细胞生长周期相仿.染毒一代结束后消化收集细胞,正常培养三天后再以相同密度接种于新的transwell膜,进行第二代染毒(T2),余相同.收集第一代(T1)、第四代(T4)、第八代(T8)细胞,进行平板克隆接种和血清抗性实验,计算平板克隆形成率,血清抗性克隆形成率.结果 随染毒代数增加,细胞形态由梭型变为不规则型,细胞体积增大,胞浆内出现大量空泡；转化实验结果显示：与对照组和第一代相比,细胞平板克隆形成率和逐渐增加,第八代(T8)细胞在含血清培养基中增殖能力明显增强,细胞表现出抗血清生长特性.结论 香烟烟雾持续染毒导致BEAS-2B细胞出现恶性转化倾向.
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