凡纳滨对虾血蓝蛋白酶解片段的凝集与抑菌活性

来源 :第十届世界华人虾蟹养殖研讨会暨2016年中国河蟹产业发展高峰论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jihuoxiazai
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  以凡纳滨对虾(Litopenaeaus vannamei)为研究对象,通过分子筛层析、Tricine-SDS-PAGE、Western-blotting、凝集实验、抑菌实验和Edman N端测序等方法探索血蓝蛋白酶解片段的凝集和抑菌活性.结果 发现,血蓝蛋白经胰蛋白酶水解后可产生分子量约为6-70kDa的7条片段,该酶解混合物对副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)具有显著的凝集活性,与未水解血蓝蛋白相比,其凝集活性可提高4-16倍.在此基础之上,进一步分离纯化该7条片段,发现片段3对副溶血弧菌表现出较强的抑菌活性,且具有较好的浓度依赖性.在浓度为75 μg/mL时,其抑菌率为93.76±2%,与阴性对照组相比,存在极显著性差异(P<0.01).进一步研究显示该片段位于血蓝蛋白N端α-螺旋区域.由此推测,凡纳滨对虾血蓝蛋白在体外经胰蛋白酶水解后可产生具有凝集、抑菌等免疫活性的片段,这对研究血蓝蛋白的降解机制及其在先天免疫中的作用具有重要意义.
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