枯草芽孢杆菌AS1.398中性蛋白酶基因npr的克隆表达

来源 :第三届全国酶制剂研究开发应用技术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chair_mao
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  以一株产中性蛋白酶的枯草芽孢杆菌AS1.398基因组DNA为模板,PCR扩增获得编码中性蛋白酶的全长基因(包含前导肽序列),目的基因大小为1485bp,成熟肽序列编码300个氨基酸,同源性100%.构建质粒npr-pBE2P43,并电转化于蛋白酶缺陷型表达菌株枯草芽孢杆菌WB600中得到重组菌.将重组菌发酵培养,并测定其酶活.结果表明,重组菌发酵液经SDS-PAGE分析和酶活测定表明,中性蛋白酶基因在枯草芽孢杆菌WB600中得到了表达,分子量约为35kD.发酵液中的中性蛋白酶活力达1008U·mL-1.
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