干扰人巨细胞病毒UL83基因对人脑动脉平滑肌细胞分泌Ang-1、Ang-2及VEGF-A的影响

来源 :2011北京地区神经内科学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pz421769788
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  目的:明确人巨细胞病毒(HCMV)感染活动性标志基因UL83对血管平滑肌细胞这一动脉粥样硬化斑块重要成份分泌促血管新生因子的影响。方法:首先,采用流式细胞仪确定FAM标记siRNA通过脂质体转入人脑动脉血管平滑肌细胞(HBVSMC)的转染效率;随后,将化学合成的3条备选siRNA,通过脂质体转染入已感染MOI=IOHCMVAD169株的HBVSMC当中,于48小时及72小时后,分别使用RT-PCR及Western Blot筛选抑制UL83基因表达最强的siRNA;接着,使用RT-PCR及Western Blot分别检测MOI=IOHCMVAD169株感染HBVSMCO小时、6小时、12小时、24小时、48小时以及72小时Ang-1, Ang-2及VEGF-A mRNA及蛋白的表达变化;最后,使用RT-PCR及WesternBlot分别检测非接毒非转染组、接毒非转染组、接毒有效干扰组以及接毒无效干扰组Ang-1、Ang-2及VEGF-AmRNA及蛋白的表达。结果:转染6小时后,95.59%的HBVSMC转染了FAM标记siRNA。结论:巨细胞病毒慢性感染参与了动脉粥样硬化发生和发展过程,感染可能是动脉粥样硬化斑块内血管新生不稳定斑块的重要激发因素,巨细胞病毒感染促进血管新生。
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