【摘 要】
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人类胚胎干细胞(hESC)和诱导性干细胞(iPSC)具有体外无限扩增和分化成各种组织的能力，是研究疾病和发育的重要模型。在这两种细胞中对目标基因组位点进行高效精确的靶向修饰具有重要的价值，是基因工程研究的重点之一。近年来靶向核酸酶技术取得了重大的进展，逐渐成为基因编辑的主流工具。我们利用类转录激活样效应因子核酸酶(TALEN)在hESC和iPSC中建立了高效的基因编辑平台，并应用其进行了NPC患者
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人类胚胎干细胞(hESC)和诱导性干细胞(iPSC)具有体外无限扩增和分化成各种组织的能力，是研究疾病和发育的重要模型。在这两种细胞中对目标基因组位点进行高效精确的靶向修饰具有重要的价值，是基因工程研究的重点之一。近年来靶向核酸酶技术取得了重大的进展，逐渐成为基因编辑的主流工具。我们利用类转录激活样效应因子核酸酶(TALEN)在hESC和iPSC中建立了高效的基因编辑平台，并应用其进行了NPC患者iPSC基因突变的精确修复。通过建立具有近端增强子敲除的OCT4 reporter hESC细胞系，我们筛选了小分子化合物库，建立了可以维持新型多能性干细胞(na(i)ve hESC)的培养体系。这些工作进一步表明了在hESC和iPSC中进行基因编辑的重要作用和巨大潜力。同时我们还优化了CRISPR介导的小鼠模型的构建方法，简化了实验方法，进一步提高了效率。
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