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建立了食用油中胆固醇的凝胶色谱净化-高效液相色谱法分析方法。将食用油用等比例混合的乙酸乙酯和环己烷的混合溶液溶解定容，直接经GPC净化后，采用反相HPLC进行分析。所用分离柱为Labtech C18(250mm×4.6mm i.d.,5μm)，流动相为甲醇。方法的相关系数为0.999997，目标物质的检出限为1.051×10-6 mg/mL。在1 g/L添加水平时样品加标回收率为84.0％～104.6%，RSD为1.52%～3.63%。本方法简便、快捷、实用，可用于测定食用油中胆固醇的分析测定。