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本文基于纳米纤维富集作用，建立了辣椒中罗丹明的高效液相色谱-荧光的检测方法。样品中的罗丹明B用去离子水提取，经纳米纤维固相萃取柱富集后，以3.0 g/L磷酸氢二钠-甲醇（体积比：30：70，pH7.0）为流动相，20μL进样，测定峰响应值。实验结果表明，在高、中、低三个加标水平下，辣椒中的罗丹明的加标回收率为98.2％-113.9%，日间与日内标准偏差均小于9%。方法的线性检测范围为1 ng/ml-100 ng/ml，检出限为0.05 ng/ml。纳米纤维对罗丹明B的绝对提取率达到80%。该方法操作简便，快速，具有较高的灵敏度和较高的重现性，能够用于辣椒等调味料中罗丹明B的含量的测定。