2014年中国广东某规模化养殖场南美白对虾大面积死亡,其症状与急性肝胰腺坏死病(Acute hepatopancreatic necrosis disease,AHPND)极为相似,为进一步确定其致病原,本研究对其病原菌进行分离鉴定。通过TCBS琼脂培养基和科玛嘉弧菌显色培养对不同病虾及池水中细菌进行分离,并利用副溶血性弧菌干制生化鉴定试剂盒进行生化鉴定。采用PCR方法对AHPND致病菌株的毒力基因pirA和pirB进行检测,设计毒力基因全长引物检查毒力基因完整性。将获得的携带毒力基因的菌株感染南美白对虾以确定菌株的致病性。本实验室从疫区共分离39株疑似AHPND致病性副溶血性孤菌。经鉴定,其中12株的AHPND标志基因pirA和pirB结果呈阳性。pirA和pirB毒力基因完整无突变。感染后第5天,南美白对虾死亡率均达到100%,并产生典型的AHPND症状。AHPND是导致此次南美白对虾大规模死亡的病因之一。