【摘 要】
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目的 探讨软骨源性形态发生蛋白1 (CDMP-1)诱导成人骨髓间充质干细胞(human bone mesenchymal stem ceils,BMSCs)成软骨细胞分化可行性及最佳诱导浓度.方法 分离培养BMSCs,免疫荧光法检测BMSCs表面CD34,CD45,CD105表达.采用含0、10、50、100ng/ml CDMP-1的软骨诱导液诱导培养BMSCs 21d,倒置显微镜观察细胞形态变化
【机 构】
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华中科技大学附属协和医院骨科,武汉,430022 华中科技大学协和医院骨疾病研究所
【出 处】
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全国骨关节与风湿病暨第三届武汉国际骨科高峰论坛
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目的 探讨软骨源性形态发生蛋白1 (CDMP-1)诱导成人骨髓间充质干细胞(human bone mesenchymal stem ceils,BMSCs)成软骨细胞分化可行性及最佳诱导浓度.方法 分离培养BMSCs,免疫荧光法检测BMSCs表面CD34,CD45,CD105表达.采用含0、10、50、100ng/ml CDMP-1的软骨诱导液诱导培养BMSCs 21d,倒置显微镜观察细胞形态变化；RT-PCR检测不同浓度CDMP-1组细胞Ⅱ型胶原和Aggrecan表达；免疫组化检测Ⅱ型胶原表达；番红O和阿里新蓝染色检测蛋白多糖表达.结果 成人BMSCs呈梭形旋窝状生长,CD44、CD105表达阳性,CD34呈阴性表达.CDMP-1诱导7天后细胞形态逐渐由长梭形向多边形、多角形转化.不同浓度CDMP-1诱导21d,Ⅱ型胶原表达量各组间差异均具有统计学意义(P＜0.05)； Aggrecan的表达CM组和10ng组之间差异量无统计学意义(P＞0.05),其它各组间差异均具有统计学意义(P＜0.05).免疫组化检测Ⅱ型胶原表达阳性,阿里新蓝和番红O染色均为阳性.结论 含100ng/ml CDMP-1软骨诱导液能有效促进成人BMSCs向软骨表型分化.
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